Online трансляция


Всероссийская научно-практическая конференция
Новые технологии в офтальмологии
Новые технологии в офтальмологии
Казань, 13-14 апреля 2017 г.



Межрегиональный круглый стол
Лечение синдрома «сухого глаза»: от поликлиники до высоких технологий
Лечение синдрома «сухого глаза»: от поликлиники до высоких технологий
Новосибирск, 19 апреля 2017 года с 12:00 до 14.00 по Московскому времени

Партнеры


Valeant thea
Allergan Фокус
santen tradomed
sentiss



Издания


Российская офтальмология онлайн Российская
Офтальмология Онлайн

№ 24 2017
№ 23 2016
№ 22 2016
№ 21 2016
...
Журнал Офтальмохирургия Журнал
Офтальмохирургия

№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
№ 2 2016 г.
№ 1 2016 г.
...
Журнал Новое в офтальмологии Новое в
офтальмологии

№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
№ 2 2016 г.
№ 1 2016 г.
...
Российская детская офтальмология Российская
детская офтальмология

№ 4 2016
№ 3 2016
№ 2 2016
№ 1 2016
...
Современные технологии в офтальмологии Современные технологии
в офтальмологии

№ 1 2017
№ 5 2016
№ 4 2016
№ 3 2016
...
Восток – Запад Восток - Запад.
Точка зрения

Выпуск 4. 2016
Выпуск 3. 2016
Выпуск 2. 2016
Выпуск 1. 2016
...
Новости глаукомы Новости
глаукомы

№1 (41) 2017
№1 (37) 2016
№1 (33) 2015

....
Мир офтальмологии Мир офтальмологии
№1 (33) Март 2017
№ 6 (32) Декабрь 2016
№ 5 (31) Октябрь 2016
№ 3 (29) Июнь 2016
....


Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Морфологическая характеристика ретинального пигментного эпителия, культивируемого in vitro, как источника клеточной репарации


1Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова Российской академии наук
2Центральная клиническая больница Российской академии наук


Институт биологии развития им. Н. К. Кольцова РАН,
Учреждение РАН «Центральная клиническая больница РАН», г. Москва
  
  Трансплантология сегодня — одно из лидирующих направлений медицины. В офтальмологии клеточные технологии на основе спектра стволовых и малодифференцированных клеток мало изучены и практически не реализованы. Между тем, в перспективе они могут быть использованы для решения проблемы репарации сетчатой оболочки глаза. Многие заболевания глаза, приводящие к потере зрения, такие как пигментный ретинит, возрастная макулодистрофия, диабетическая ретинопатия и глаукома, сопровождаются гибелью нейронов сетчатки. В связи с чем, поиск источника клеточной регенерации является чрезвычайно актуальной задачей современности.
  Совсем недавно считали, что нейрональные клетки центральной нервной системы (ЦНС) млекопитающих в период эмбрионального и раннего постнатального развития за счет экспрессии большого количества морфогенетически важных факторов имеют высокий регенеративный потенциал. В ходе дифференцировки нервной ткани эти факторы исчезают, а способность к регенерации утрачивается. Сегодня взгляды на регенерацию нервных клеток кардинально изменились. В мозге и сетчатке взрослых млекопитающих, к которым относится и человек, были выявлены клетки, обладающие свойствами стволовых клеток. В сетчатке свойствами стволовости наделяют ретинальный пигментный эпителий (РПЭ). Терапевтический потенциал РПЭ представляет особый интерес. Биологическая эволюция приспособила его для защиты сетчатки. Нейропротекторные свойства РПЭ осуществляет, экспрессируя ряд специфических факторов.
  
  Цель — изучить характеристику РПЭ, культивируемого in vitro, как источника клеточной репарации сетчатки.
  
  Материал и методы. Источником РПЭ служил аутопсийный материал. Глазные яблоки обрабатывались через 12–48 часов после смерти доноров. После процедуры извлечения РПЭ переносили в стерильную пробирку, пипетировали и центрифугировали 5 минут при 600 об/мин до осаждения клеток. Клетки ресуспендировали в ростовой среде, состоящей из DMEM/F12, 100 U/ml пенициллина и 100 μg/ml стрептомицина (Sigma, USA). Далее РПЭ равномерно распределяли в 1–2 стерильных пластиковых флаконах площадью 25 см². Первичную культуру РПЭ выращивали на двух средах DMEM/F12 и DMEM/ F12 с добавлением антибиотиков (см выше). Культуры культивировали при 37 °С, влажности воздуха 95 %, 5 %СО2. Через 3–4 дня среду аспирировали и удаляли. Клеточное прикрепление и образование колоний контролировали методом фазовоконтрастной микроскопии. Прикрепление клеток продолжалось в течение 2 недель.
  
  Результаты и обсуждение. Свежевыделенные эксплантаты РПЭ состояли из небольших групп и единичных клеток полигональной формы, а также крупных густо пигментированных эпителиоидных клеток.
  Жизнеспособные клетки РПЭ начинали делиться и создавать пигментированные первичные колонии сразу после прикрепления. Процесс адгезии клеток начинался в конце первых суток (24 часа) и продолжался до двух недель. Распластываясь на дне пластикового флакона, крупные клетки РПЭ принимали плоскую и полигональную форму. Гранулы пигмента собирались глыбками вокруг ядра, содержащего 1 или 2 ядрышка. Цитоплазма на периферии была тонкой и относительно прозрачной. Межклеточные границы были резко очерчены. Деление РПЭ сопровождалось измельчением размеров клеток и депигментацией. По мере созревания колоний в клетках полностью пропадал пигмент.
  На рост колоний играл факт плотности посадки: при высокой плотности — конфлюэнтный монослой образовывался быстро, при низкой — рост замедлялся. В первом случае клетки приобретали гексагональную форму; а во втором — веретенообразную с отростками или без них. Клетки РПЭ удлинялись при большем пространстве для роста. Достижение конфлюэнтности монослоем РПЭ ассоциировалось с гексагональной формой, характерной для эпителиоподобного типа клеток. Деление и миграцию РПЭ фиксировали исключительно по периферии колонии. В центре колонии клетки оставались статичными и не пролиферировали, т. е. РПЭ дедифференцировался. На скорость роста и плотность РПЭ в пласте влияли добавления в питательную среду различных ростовых факторов. В среде с N2 и bFGF колонии были более плотными и многочисленными по сравнению с культурами без них. При плотной посадке клеток РПЭ наблюдали некую многослойность: один пласт клеток начинал нарастать на другой.
  
  Выводы. Нативные клетки РПЭ при культивировании способны формировать неподвижный монослой, сохраняя способность к делению. В условиях in vitro РПЭ дедифференцируется и трансформируется, обретая округлую/веретенообразную клеточную форму, способность к активному делению и миграции, процесс сопровождается утратой способности синтеза пигмента. Таким образом, в зависимости от условий культивирования in vitro РПЭ может менять свою дифференцировку, переходя из состояния эпителиальной дифференцировки в дедифференцированное состояние и обратно. В сравнении с дифференцированными клетками дедифференцированный РПЭ обладает большими потенциями: он более активно пролиферирует, мигрирует, чрезвычайно пластичен. т. е. он может служить источником клеточной репарации сетчатки при повреждении ее различными патологическими процессами.


Страница источника: 241

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru