Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Экспериментальное исследование воздействия инфракрасного диодного лазерного излучения в микроимпульсном режиме на культуре клеток ретинального пигментного эпителия


1МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова Росмедтехнологии» Минздрава РФ
2Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии Российской академии медицинских наук

Лазерное лечение центральной патологии сетчатки применяется на протяжении нескольких десятилетий, и эффективность этого метода бесспорна. Однако традиционная методика субпорогового аргонового лазерного лечения области макулы опасна по причине коагуляционного повреждения нейросенсорного слоя сетчатки, которое приводит к появлению скотом в центральном поле зрения больного.
В последнее время при лечении патологии центральной области сетчатки для исключения серьезных побочных эффектов традиционного лазерного воздействия используют более щадящее инфракрасное лазерное излучение в режиме микроимпульсации. Длинноволновое лазерное излучение слабо поглощается ксантофиллом и липофусцином и проходит через внутренние слои сетчатки желтого пятна, не повреждая их. По этой причине диодный лазер считается «коагулятором выбора» в лечении патологии макулы. Данной проблеме посвящено множество научных исследований и публикаций.
Проведенные экспериментальные работы на кроликах и гистологический анализ реакции тканей хориоретинального комплекса в ответ на инфракрасное лазерное воздействие в микроимпульсном режиме показали, что изменения возникают только в слое ретинального пигментного эпителия (РПЭ), с небольшим вовлечением наружных слоев сетчатки и хориокапилляров, при полной сохранности внутренних слоев, и являются частично обратимыми.
Однако сетчатка кролика в анатомо-физиологическом аспекте имеет существенные отличия от сетчатой оболочки человека, и не всегда результаты экспериментальных работ на кроликах можно экстраполировать на человека. Таким образом, вопрос непосредственной реакции клеток РПЭ человека на воздействие лазерного излучения инфракрасного спектра в режиме микроимпульсации остается открытым.


Цель работы — оценить воздействие инфракрасного диодного лазерного излучения в режиме микроимпульсации на культуре клеток РПЭ человека.


Материал и методы
Экспериментальное исследование было проведено на культуре клеток пигментного эпителия сетчатки человека. Одним из главных преимуществ культивируемых клеток является возможность прижизненного наблюдения клеток с помощью микроскопа, что делает их незаменимой моделью для проведения множества исследований в биологии, фармакологии и медицине. Клетки РПЭ человека культивировали в стандартных условиях (37°С, 5% СО2). На третьем пассаже культуру пассировали на три 96-луночные планшетки в плотности 3000 клеток на лунку и культивировали до образования монослоя на протяжении 7 дней.
Клетки в каждой лунке подвергали воздействию лазерного излучения с использованием базисной лазерной установки «Iris Medical IQ 810 IRIDEX Corporation» (США) и эндоскопического устройства «Endo Probe» для подачи лазерного излучения непосредственно в лунку планшетки. Облучение клеток РПЭ проводили в режиме микроимпульсации по одному пакету импульсов на каждую лунку без удаления полной ростовой среды при следующих режимах лазерного воздействия: длина волны 810 нм; длительность пакета импульсов 100-300 мс; длительность одного микроимпульса 0,025-0,1 мс; рабочий цикл микроимпульса 2-10%; мощность излучения 750-1500 мВт.
После облучения культуры окрашивали иодидом пропидия, проникающим в погибшие клетки, фиксированные препараты изучали с использованием флюоресцентного инвертированного микроскопа «CKX 41» (Olympus, Япония) в видимом и ультрафиолетовом световых диапазонах. В проходящем свете производили подсчет всех клеток РПЭ, находящихся в поле зрения микроскопа, а в ультрафиолетовом диапазоне — только окрашенных йодидом пропидия (погибших) клеток. Подсчет клеток производился рутинным методом с помощью цифровой фотографии и персонального компьютера, в результате было выведено процентное соотношение погибших клеток в каждой лунке.


Результаты
При исследовании влияния инфракрасного диод-лазерного излучения в микроимпульсном режиме на клетки культуры пигментного эпителия сетчатки человека было выявлено, что доля погибших клеток при использовании различных параметров составила всего 0,94-3,21% от общего их количества.
Минимальная доля погибших клеток составила 0,94% и наблюдалась при следующих параметрах лазерного воздействия: длительность пакета импульсов — 300 мс, длительность одного микроимпульса — 0,1 мс; рабочий цикл микроимпульса — 9,1%, мощность излучения — 750-1000 мВт.


Вывод
Результаты исследования свидетельствуют о безопасности применения инфракрасного излучения в микроимпульсном режиме для клеток РПЭ человека. Полученные данные представляют интерес для использования в клинической практике.

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru