Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Использование конфокальной микроскопии для визуализации осложнений лазерного интрастромального кератомилеза


1МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава РФ

Конфокальная микроскопия (КМ) позволяет проводить исследования биологических тканей на клеточном уровне в состоянии функциональной активности и осуществлять демонстрацию результатов в четырех измерениях - высота, ширина, глубина и время. Качество получаемого изображения коррелирует с прозрачностью объекта. Таким образом, оптимальные условия и, одновременно, широчайшие возможности для изучения, предоставляет роговица глаза [5].
Принцип КМ предложен Minsky в 1957 году и позднее модифицирован Egger и Petran в тандемную сканирующую конфокальную систему, основным элементом которой является диск Nipkow [7].
Современное применение конфокальных микроскопов в офтальмологии делится на научно-исследовательское, экспертное и клиническое.
Научно-исследовательское направление заключается в описании и анализе различных состояний роговицы, как находящейся в нормальном физиологическом состоянии, так и при травмах, воспалительных заболеваниях, дистрофиях роговицы, при исследовании процессов неоваскуляризации после ожогов роговицы, репаративных процессов, для оценки реакции роговицы на лекарственные средства, трансплантаты, инородные включения [5].
Экспертное применение КМ позволяет проводить оценку воздействия на роговицу фармакопрепаратов, контактных линз, имплантатов [6].
Клиническое направление выводит офтальмологию на качественно новый уровень прижизненной динамической визуализации гистоморфологических изменений роговицы различной этиологии [5]. В кераторефракционной хирургии КМ используется для оценки включений в интерфейсе [1], клеточных элементов, состояния интракорнеальных нервных волокон, для измерения толщины лоскута после LASIK, диагностики флера и дифференциальной диагностики помутнений роговицы [2,4].
В «доконфокальный» период в арсенале офтальмологов отсутствовали методы, позволяющие изучить прижизненную гистоморфологическую структуру роговицы пациента, что затрудняло полноценное понимание таких процессов, как послеоперационное заживление, рубцевание и др., и приводило к необходимости экстраполяции результатов морфологических исследований экспериментальных животных на клиническое течение у пациентов [3].
В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы явилось определение морфологических особенностей различных осложнений лазерного интрастромального кератомилеза (ЛАЗИК) с помощью конфокальной микроскопии роговицы.
Материалы и методы:
Для изучения гистоморфологии роговицы пациентов in vivo применяли конфокальный микроскоп Confoscan 4 (Nidek, Japan) со следующими параметрами: линза для исследования через иммерсионный гель – 40х, NA 0,75, WD 1,98 мм, Zeiss; исследуемая зона роговицы- 460 х 345 ?m, получаемое изображение - 768 х 576 pixel, латеральное разрешение - 0,6 ?m/pixel, скорость сканирования – 25 снимков в секунду. При исследовании использовали автоматический режим сканирования всей толщины роговицы, мануальный режим для визуализации определенных корнеальных структур, функцию автоматического подсчета плотности эндотелиальных клеток с оценкой полиморфизма и размера клеток, а также функцию оптической пахиметрии (с помощью Z-ring).
Обследовано 76 пациентов (121 глаз) с верифицированными клинически послеоперационными осложнениями после ЛАЗИК.
Результаты конфокальной микроскопии.
1. Гипосекреторная форма синдрома сухого глаза с нейротрофичекой эпителиопатией: на поверхности эпителия обнаружено большое количество гиперрефлектирующих включений, вероятно, адсорбировавшихся из патологически измененной слезной жидкости; в поверхностных слоях эпителия визуализируется большое количество псевдокератинизированных эпителиоцитов, чередующихся с локальными эпителиальными дефектами; метаплазия крыловидных эпителиоцитов (клетки увеличены в размерах, неправильной формы, отмечается выраженный полиморфизм, они содержат гиперрефлектирующие ядра с нарушенным (увеличенным) соотношением ядро/цитоплазма); в строме отмечается большое количество дендриформных клеток Лангерганса и воспалительных клеток макрофагального ряда.
2. Асептический отек роговичного клапана в раннем послеоперационном периоде: выявляется отек цитоплазмы эпителиоцитов, нарушение цитоархитектоники и отсутствие четких границ эпителиальных слоев, отек боуменовой мембраны, диффузное помутнение экстрацеллюлярного матрикса, а также утолщение роговичного лоскута до 170 мкм при расчетной толщине клапана, сформированного кератомом Zyoptix – 105 мкм.
3. Неспецифический диффузный ламеллярный кератит: в ранней стадии - очаговое скопление полиморфных клеток (макрофаги, «активные клетки», дендриформные клетки) в области интерфейса, локальный отек экстрацеллюлярного матрикса по периферии фокуса ДЛК; в поздней стадии – локальные очаги фиброплазии в интерфейсе с четкой демаркацией от интактной стромы.
4. Врастание эпителия под клапан: скопление эпителиальных клеток, аналогичных базальным эпителиоцитам в интерфейсном пространстве, имеющее связь с краем клапана, локальная зона перифокального отека.
5. Послеоперационная кератэктазия: эпителий практически не изменен, толщина роговичного лоскута от 95 до 130 мкм; по обеим сторонам интерфейса - обширная интрастромальная ацеллюлярная зона общей протяженностью 100 - 160 мкм. Она представляла собой экстрацеллюлярный матрикс с неполной прозрачностью и отсутствием дифференцированных клеточных элементов. Визуализировались «обрывки» нервных волокон, воспалительные клетки макрофагального ряда и дендриформные клетки Лангерганса, мигрирующие из корнеосклеральной зоны. У всех пациентов в области ацеллюлярной зоны визуализировались разнонаправленные линии разрежения стромы, аналогичные линиям Фогта при первичном кератоконусе. Однако в отличие от них, обнаруженные нами линии находились в передней части стромы и были более хаотично расположены.
Заключение.
Таким образом, проведенные с помощью конфокальной микроскопии витальные гистоморфологические исследования роговицы у пациентов с атипичным послеоперационным течением ЛАЗИК, позволили определить морфологические особенности некоторых осложнений и прояснить их этиопатогенетические звенья.
Список литературы.
1. Алио Х.Л., Хавалой Х., Негри Э.П. и соавт. Качество интерфейса роговичного лоскута после ЛАСИК. Исследование с помощью конфокального микроскопа // Офтальмология.- 2004.- том 1, № 3.-С.12-24
2. Качалина Г.Ф., Майчук Н.В., Кишкин Ю.И., Майчук Д.Ю Использование конфокальной микроскопии – метода прижизненной визуализации ультраструктуры роговицы в кераторефракционной хирургии / В сб. научн. статей VII Международной научно-практической конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии – 2006»: М., 2006.- С. 82-89.
3. Buratto L., Brint S. LASIK Surgical Techniques and Compilations // Hard Cover. – 2000. – 624 p.
4. Kauffmann T., Bodanowitz S., Hesse L. et al. Corneal reinnervation after photorefractive keratectomy and laser in situ keratomileusis: an in vivo study with a confocal videomicroscope // Ger. J. Ophthalmol.- 1997.-N5.- P.508 – 512.
5. Lemp M.A., Dilly P.N., Boyde A. Tandem-scanning (confocal) microscopy of the full-thickness cornea // Cornea.- 1985/1986.- vol. 4.- P. 205 – 209.
6. Masters B.R., Bohnke M. Three-dimensional confocal microscopy of the human cornea in vivo // Ophthalmic. Res.- 2001.- vol. 33.- P. 125 – 135.
7. Minsky M. Memoir on inventing the confocal scanning microscope // Scanning.- 1988.- Vol. 10.- P. 128 – 138.

 ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества

Сателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Росс...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Эндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференцияЭндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенациональн...

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Рейтинг@Mail.ru