Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Результаты морфологических исследований имплантации биологического контейнера с наноструктурированной плацентой человека в эксперименте


1Республиканская офтальмологическая клиническая больница Минздрава Удмуртской Республики
2Ижевская государственная медицинская академия Росздрава
3Физико-технический институт Уральского отделения Российской академии наук

Актуальность.
В основе широкого внедрения склеропластических операций при прогрессирующей близорукости до настоящего времени был заложен принцип только экстрасклерального пломбирования ? формирования дополнительной соединительной ткани на поверхности склеры. При этом использовались биологические ткани в виде макроскопических трансплантатов или крупнодисперсного порошка. Нами разработан способ получения биологического материала в виде нанодисперсных частиц (заявка на изобретение №2008101216/15 от 09.01.2008), а также биологический контейнер (БК), представленный отрезком сосуда пуповины, заполненный взвесью наноструктурированной плаценты (заявка на изобретение №2008113277/14 от 04.04.2008), для реваскуляризации и интрасклерального укрепления фиброзной оболочки глазного яблока.
Цель работы – морфологическое изучение репаративных процессов в зоне имплантации биологического контейнера с наноструктурированной плацентой человека.
Материал и методы. Исследования выполнены на кроликах породы шиншилла в возрасте от 1 года до 2 лет с массой тела от 3 кг до 3,5 кг. Забор пуповины и плаценты производился в акушерско-гинекологических стационарах в ходе кесарева сечения и родов доношенным плодом. Приготовление материалов и консервацию осуществляли в отделении заготовки тканей ГУЗ «РОКБ МЗ УР», имеющего лицензию на данный вид деятельности. Биоконтейнер представлял собой отрезок сосуда пуповины длиной не более 10 мм. Заполнялся измельченной до наночастиц плацентой человека. Наноструктурированная плацента получена в результате обработки механоактивацией в шаровой планетарной мельнице и представляла собой слабосвязанные агломераты с размером отдельных зерен 40-100 нм. Концы биоконтейнера завязывали узловыми биошвами. Хранение осуществляли в 0,2%-ом спиртовом растворе тимола, содержащем хлорид лития.
Имплантацию БК производили под местной анестезией субтеноново в верхне-наружном квадранте глазного яблока кролика. В контроле производили имплантацию БК, содержащего крупнодисперсную взвесь плаценты человека с размерами частиц от 2 мкм и более. Морфологические исследования тканей глаз животных проводили через 3 дня, 10 дней, 1, 2 и 3 месяца после пересадки. Срезы окрашивали гематоксилином-эозином и по Ван-Гизону. Полученные гистологические срезы исследовали также на сканирующем зондовом микроскопе Solver Pro (NT-MDT) в полуконтактном режиме после предварительной химической очистки препаратов от парафина.
Результаты и обсуждение.
В ходе проведенных экспериментальных исследований отмечено, что послеоперационный период у кроликов протекал без видимых осложнений, не наблюдалось явной картины отторжения и вторичной инфекции.
В зоне имплантации БК на 3-е сутки после пересадки во всех рассмотренных случаях имплантат сосуда пуповины сохранялся, отмечалась умеренная воспалительная инфильтрация как стенки сосуда, так и прилежащих тканей реципиента. Это были в основном сегментоядерные нейтрофилы, по периферии концентрировались лимфоциты и единичные эозинофилы. Прилегающий участок склеры реципиента в опыте характеризовался разволокнением стромы, содержащей, наряду с клетками лейкоцитарного ряда, мелкие пылевидные полихроматофильные частицы. Такие же частицы – агломераты находились внутри пуповинного сосуда, а также в толще его стенки. При этом отмечено сохранение наноразмерной структуры измельченной плаценты 40-100 нм. По периферии инфильтрата, в склере, эписклере и слизистой оболочке регистрировалось расширение кровеносных сосудов. В контроле также наблюдалась воспалительная инфильтрация зоны имплантации. В просвете БК содержались базофильные крупные частицы. Разволокнение поверхностных слоев склеры, их инфильтрация под биоконтейнером не отмечалось.
На 10-е сутки имплантации наблюдались процессы распада и фагоцитоза стенки БК, остатки его были также инфильтрированы воспалительными элементами, но стало значительно больше эозинофилов. В полости и стенке БК, в прилежащей конъюнктиве и склере по-прежнему прослеживались мелкодисперсные неклеточные структуры. Вокруг клеточных скоплений начинались процессы коллагеногенеза. В контроле также отмечен лизис стенки БК и проникновение в нее крупнодисперсной взвеси, которая не проникала в склеру реципиента.
Через месяц пуповинный сосуд микроскопически, как в опыте, так и в контроле, не определялся, наблюдались лимфоцитарные скопления с примесью эозинофилов и пролиферирующих фибробластов, клеток эндотелиоцитарного ряда. В опыте фибробласты формировали тонкую соединительно-тканную капсулу. В капсуле содержалось множество сформированных гемокапилляров, эндотелиальные почки роста и протокапилляры, что указывает на выраженные процессы ангиогенеза в непосредственном окружении имплантата. Отмечалось небольшое разволокнение волокон стромы, с наружной стороны. В контроле склеральная оболочка практически интактна. Процессы ангиогенеза менее значительны.
Через 2 месяца имплантации в опыте и контроле имплантированные частицы обнаруживали в подслизистой. Вокруг образовалась капсула, внутренние слои которой состояли из эпителиоидных клеток и крупных макрофагов, содержащих в опыте мелкие пылевидные частицы. Наружные слои капсулы состояли из вновь образованной рыхлой соединительной ткани с множеством вновь сформированных сосудов, активных фибробластов. В опыте строма склеры несколько разрыхлена, по периферии склеры определялось множество юных фибробластов. Вблизи зоны имплантации имеется высокий уровень микроциркуляции. В контроле склера интактна.
Через 3 месяца на месте БК была четко видна хорошо выраженная грануляционная ткань с эпителиоидными клетками и макрофагами, содержащими в цитоплазме мелкодисперсные частицы. Вокруг виднелась хорошо оформленная соединительно-тканная капсула. В наружных слоях склеры также наблюдалось увеличение числа активных фибробластов, окруженных новообразованными коллагеновыми волокнами, выявляемых при окраске пикрофуксином по Ван-Гизону. В контроле также наблюдалась новообразованная грануляционная ткань на поверхности склеры, однако новообразование коллагеновых волокон в самой склере не отмечено.
Выводы.
Таким образом, полученные данные указывают на значительные биологические эффекты, возникающие в зоне имплантации биоконтейнера с наноструктурированной плацентой. При этом происходит укрепление как собственно склеры реципиента, так и формирование плотного соединительно-тканного образования в зоне имплантации на поверхности склеры. Усиленный ангиогенез, вероятно, связан с высоким ангиостимулирующим влиянием наноструктурированного материала плаценты.
Reparation processes in zone of the implantations of the biological container with humans nanoplacenta were studied in experiment on rabbits. Significant biological effects were received in zone of the implantations: immulogical inflammation, introduction particles of the nanoplacenta in rabbit sclera and as result the formation of connecting-tissue on sclera surfaces, neoangiogenesis and formation of new collagen filaments in sclera.

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru