Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

К вопросу дифференциальной диагностики возрастной и осложненной катаракт


1Воронежский государственный медицинский университет имени Н. Н. Бурденко

Цель - определение маркеров нарушения метаболизма при развитии катаракт различного генеза на основе протеомных технологий.
Материал и методы. Выбраны две группы пациентов. 1-я группа – 25 пациентов с возрастной катарактой различной степени зрелости. 2-я – 15 больных с диабетической катарактой (полной и неполной) на фоне ПВР. Забор слезной жидкости в объеме 0,1 мл осуществлялся без дополнительной стимуляции с помощью канюли (ЭТП «МНТК «Микрохирургия глаза»), которая помещалась в нижний свод конъюнктивального мешка. Слезная жидкость замораживалась сразу после взятия при -200С и хранилась без повторного размораживания не более 14 дней. Использовалась переднекамерная жидкость, взятая в процессе операции факоэмульсификации или экстракапсулярной экстракции катаракты. Контролем служил материал трупов: переднекамерная жидкость, стекловидное тело. Забор материала проводился с помощью микрохирургического инструментария через 2 часа после смерти. Объем взятой переднекамерной жидкости был равен 0,05 мл. Переднекамерная жидкость замораживалась сразу после взятия при -200С и хранилась без повторного размораживания не более 14 дней. Исследование белкового состава слезы, жидкости передней камеры, стекловидного тела, субретинальной жидкости пациентов проводили с помощью PAAG электрофореза в присутствии SDS образцов слезы до и после лечения. Среднюю концентрацию белка в пробах определяли спектрофотометрически с использованием спектрофотометра Nano-Drop 1000, Western–блот, для дальнейшего иммуноферментного анализа присутствия пептидов, белков и фрагментов белков в биологических жидкостях глаза мажорные белки слезы, жидкости передней камеры, стекловидного тела, субретинальной жидкости анализировали методом MALDI-TOF - триптический гидролиз белка в полиакриламидном геле, надгелевый раствор использовали для получения MALDI-масс-спектров. Подготовку образцов для масс-спектрометрии проводили смешиванием на мишени раствора образца и раствора 2,5-дигидроксибензойной кислоты, масс-спектры получали на MALDI-времяпролетном масс-спектрометре Ultraflex II BRUKER (Германия), оснащенном УФ лазером (Nd) в режиме положительных ионов с использованием рефлектрона. Идентификацию белков осуществляли при помощи программы Mascot (www.matrixscience.com). Поиск проводился в базе данных NCBI.
Результаты. В составе слезы 1-й группы пациентов (возрастная катаракта различной степени зрелости) были идентифицированы следующие белки: I. Chain A, Structure Of Human Apolactoferrin At 2.0 A Resolution, II.Chain A, Crystal Structure Of Human Fcari Bound To Iga1-Fc III.Chain B, Human Zinc-Alpha-2-Glycoprotein, V.Chain A, Crystal Structure Of Mutant Human Lysozyme Substituted At Left-Handed Helical Positions. Кроме того, был выявлен маркер развития возрастных изменений хрусталика - пероксиредоксин VI в пробах. Во всех образцах при возрастной катаракте проявлялась полоса в области 14 килодальтон. Нами выявлена деградация пероксиредоксина VI на фрагменты с массой около 14 килодальтон. В группе пациентов с осложненной диабетической катарактой и ПВР маркер полностью отсутствовал или был выявлен в сверхмалых количествах. При исследовании переднекамерной жидкости у пациентов 2-й группы были идентифицированы следующие белки: 1 Chain A, Human Serum Albumin Mutant R218p Complexed With Thyroxine (3,3',5,5'-Tetraiodo-L-Thyronine, 2 Chain A, 2.0 Angstrom Structure Of Intact Alpha-1-Antitrypsin: A Canonical Template For Active Serp, 3a Chain A, 2.85 A Crystal Structure Of Pedf etc. Кроме того, был выявлен маркер развития метаболических нарушений при осложненной катаракте и ПВР - белок 45 kDa - транспортер гидрофобных соединений семейства Sec - 14p – подобных белков.
Выводы.
Пероксиредоксин VI (PRDX6) – важный антиоксидантный белок, который играет важную роль в метаболизме фосфолипидов. Manevich и Fisher доказали, что содержание PRDX6 стабильно повышено в клетках, защищенных от оксидативного стресса. Снижение концентрации белка приводит к усугублению механизмов апоптоза у пациентов с диабетической катарактой и ПВР, что приводит к большему числу послеоперационных осложнений в этой группе. Таким образом, отсутствие маркера в слезе может служить основанием для планирования хирургического вмешательства, как при высокой степени риска, и при этом расценивать любую катаракту как осложненную.
In this study we investigated the effects of peroxiredoxin 6 (PRDX6) on the proliferation and cataract formation. 2 groups of patients were evaluated for expression of PRDX6 by SDS PAAG –electrophoresis, spectrophotometry and invasion assay, western blot mass spectrometry in tears, intraocular , subretinal fluid, vitrum. The 1 group -25 cataract patients. The 2 group – diabetic cataract patients with PVR (15). Overexpression of PRDX6 , 45 kDa in 1 group (cataract patients ) compared with diabetic cataract patients with PVR was confirmed. The enhancement was associated with decreasing levels of PRDX6 in tears and Sec -14p marker of intraocular fluid in diabetic patients. PRDX6 is an important antioxidant enzyme and has a major role in ocular phospholipid metabolism.
Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru