Online трансляция


Трансляция симпозиумов в рамках Международного офтальмологического конгресса
Белые ночи
Белые ночи
Санкт-Петербург
29 мая - 2 июня 2017 г. Трансляция проводится из двух залов:
Зал «Стрельна»
Зал «Санкт-Петербург»


Международная конференция по офтальмологии
Восток–Запад
Восток–Запад
Уфа
8 - 9 июня 2017 г.

Партнеры


Valeant thea
Allergan Фокус
santen tradomed
sentiss



Издания


Российская офтальмология онлайн Российская
Офтальмология Онлайн

№ 24 2017
№ 23 2016
№ 22 2016
№ 21 2016
...
Журнал Офтальмохирургия Журнал
Офтальмохирургия

№ 1 2017 г.
№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
№ 2 2016 г.
...
Журнал Новое в офтальмологии Новое в
офтальмологии

№ 1 2017 г.
№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
№ 2 2016 г.
...
Российская детская офтальмология Российская
детская офтальмология

№ 1 2017
№ 4 2016
№ 3 2016
№ 2 2016
...
Современные технологии в офтальмологии Современные технологии
в офтальмологии

№ 1 2017
№ 5 2016
№ 4 2016
№ 3 2016
...
Восток – Запад Восток - Запад.
Точка зрения

Выпуск 4. 2016
Выпуск 3. 2016
Выпуск 2. 2016
Выпуск 1. 2016
...
Новости глаукомы Новости
глаукомы

№1 (41) 2017
№1 (37) 2016
№1 (33) 2015

....
Мир офтальмологии Мир офтальмологии
№1 (33) Март 2017
№ 6 (32) Декабрь 2016
№ 5 (31) Октябрь 2016
№ 3 (29) Июнь 2016
....


facebooklogo     youtubelogo



Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Закономерности регенерации роговицы при эндотелиально-эпителиальной дистрофии на фоне локального применения аутологичных мононуклеаров крови


1Сибирский государственный медицинский университет Минздрава РФ

    Актуальность

     Эндотелиально-эпителиальная дистрофия (ЭЭД) роговицы является тяжелым, прогрессирующим заболеванием, обусловленным декомпенсацией эндотелиального слоя роговой оболочки [2, 5]. Эндотелий роговицы участвует в синтезе протеинов, контролирует проникновение веществ из водянистой влаги в основное вещество, обеспечивая нормальную гидратацию стромы, необходимую для поддержания прозрачности роговой оболочки. При ЭЭД дисфункция эндотелиальных клеток приводит к увеличению гидратации стромы роговицы, снижению количества кератоцитов и гликозаминогликанов основного вещества. В совокупности указанные изменения приводят к еще большему отеку стромы и эпителия роговицы.

    Лечение ЭЭД роговой оболочки проводится с использованием консервативных и хирургических методов [3, 5]. В консервативном лечении широко используются кератопротекторы и метаболические средства, лазерная терапия, аутогемотерапия, лечебные контактные линзы. Однако фармакотерапия оказывает лишь кратковременный, положительный эффект, носит симптоматический характер, и, как следствие, не способствует выздоровлению пациента, откладывая функциональную реабилитацию. Хирургические способы лечения ЭЭД, такие как передняя послойная кератопластика, аутоконъюнктивальная пластика, подшивание амниотической оболочки, трансплантация капсулы хрусталика или желатиновой пленки в слои роговицы также носят паллиативный характер и не являются патогенетически обоснованными [1, 6, 7, 9]. Стандартом лечения ЭЭД до настоящего времени является сквозная кератопластика [6, 7]. Однако наличие швов и осложнения, связанные с ними, открытый характер операции, опасность сквозного вертикального рубца роговицы, зависимость исхода операции от придаточного аппарата глаза – все это обусловливает поиск и разработку новых, более эффективных способов лечения ЭЭД. В связи с выше изложенным особый интерес представляет клеточная терапия с применением аутологичных клеток, например, мононуклеаров крови. Клетки данной популяции обладают высоким секреторным потенциалом и функциональной полипотентностью, т.е. пластичностью и способностью адаптироваться к любому микроокружению [4, 8].

    Цель

    В эксперименте изучить закономерности регенерации при ЭЭД роговицы на фоне локального (внутрикамерного) применения аутологичных мононуклеаров крови.

    Материал и методы

    Выполнена серия экспериментов на 24 половозрелых крысах – самцах породы Wistar . На I этапе животным в условиях операционной под наркозом моделировали ЭЭД путем механического повреждения и удаления эндотелия роговицы одного из глаз. На II этапе через две недели после развития патологического процесса в роговой оболочке животные в зависимости от планируемого лечения были разделены на 2 группы: основная – 12 крыс (24 глаза), которым выполняли локальное (внутрикамерное) введение аутологичных мононуклеаров крови. В условиях операционной под наркозом с соблюдением правил асептики и антисептики каждому животному в роговице с предварительно индуцированной ЭЭД выполняли два парацентеза, в один из которых устанавливали ирригационную систему с подачей стерильного воздуха в переднюю камеру. Через второй парацентез с помощью шприца в переднюю камеру на границе внутренней поверхностью роговицы и воздухом вводили суспензию аутологичных мононуклеаров крови, аккуратно наслаивая ее на поврежденную заднюю поверхность роговой оболочки. Ирригационную систему удаляли, края парацентезов гидратировали. Мононуклеарные клетки из крови экспериментальных животных выделяли методом фракционирования на градиенте плотности. Группа сравнения – 12 крыс (24 глаза), которым проводилось традиционное консервативное лечение (метаболические средства, кератопротекторы).

    Общая продолжительность эксперимента составила 35 суток. В ходе эксперимента проводили наружный осмотр, фоторегистрацию. Забор материала осуществляли на 3, 7, 14 и 21 сутки от начала эксперимента. Полученный материал фиксировали для световой микроскопии, окрашивали гематоксилином и эозином и по методу Ван-Гизона.

    Результаты

     Анализ результатов лечения ЭЭД роговицы в эксперименте выявил значительную эффективность внутрикамерного применения аутологичных мононуклеаров крови. В ходе морфологического исследования были получены следующие данные. Через две недели после индуцирования ЭЭД у животных обеих групп в роговице обнаруживались характерные для данного патологичного процесса изменения (рис. 1). Передний эпителий многослойный с признаками баллонной дистрофии. Количество дистрофически измененных эпителиоцитов составляло 19±1,0 клеток в поле зрения. Толщина переднего эпителия находилась в пределах 34,1±0,5 мкм. Собственное вещество роговицы представлено гидратированными коллагеновыми волокнами, между которыми обнаруживались тканевые щели общей площадью до 1250±120 мкм2. Задняя пограничная мембрана была неравномерно утолщена, эндотелий отсутствовал на всем протяжении.

    На 3-и сутки у животных основной группы среди клеток переднего эпителия роговой оболочки толщиной 23,7±1,4 мкм обнаруживались единичные клетки с явлениями баллонной дистрофии – 1,2±0,1 в поле зрения. Собственное вещество роговой оболочки было представлено рыхло расположенными коллагеновыми волокнами, площадь тканевых щелей между которыми сократилась до 567±95 мкм2, что свидетельствовало об уменьшении гидратации стромы роговицы. Эндотелий отсутствовал. У животных группы сравнения передний эпителий был представлен дистрофически измененными эпителиоцитами – до 20±1,3 клеток в поле зрения. Его толщина составляла 35,9±0,8 мкм. Строма представлена рыхло расположенными коллагеновыми волокнами, среди которых обнаруживались полости общей площадью 1197±110 мкм2. Эндотелий отсутствовал.

    На 7-е сутки у животных основной группы передний эпителий имел нормальное строение. В собственном веществе роговицы ход коллагеновых волокон на уровне передних 2/3 стромы становился более упорядоченным, в задней 1/3 стромы пучки коллагена сохраняли повышено извитой ход. Площадь полостей между волокнами уменьшалась до 449±63 мкм2. Со стороны эндотелия обнаруживалась выраженная пролиферация клеток отростчатой формы (рис. 2). У животных группы сравнения цитоплазма эпителиоцитов переднего эпителия содержала большое количество вакуолей, ядра клеток были гиперхромны. Толщина эпителия – 33,4±0,9 мкм. Коллагеновые волокна собственного вещества роговицы с явлениями отека. Площадь тканевых щелей составляла 986±90,5 мкм2. Эндотелий отсутствовал.

    На 14-е сутки у животных основной группы передний эпителий без признаков дистрофии. Коллагеновые волокна стромы лишь вблизи задней пограничной мембраны были незначительно раздвинуты отечной жидкостью. Общая площадь тканевых щелей не превышала 195±44 мкм2. Эндотелий был представлен одним слоем отростчатых клеток (рис. 3). В группе сравнения в значительном количестве обнаруживались дистрофически измененные эпителиоциты – 2,6±0,25 клеток в поле зрения. Толщина переднего эпителия составляла 30±0,8 мкм. Среди коллагеновых волокон основного вещества сохранялись неравномерно выраженные явления отека. Площадь тканевых щелей – 665±93 мкм2. Местами обнаруживались новообразованные сосуды. Эндотелий представлял собой неравномерный, местами слущивающийся слой дистрофически изменённых клеток.

    На 21-е сутки у животных основной группы передний эпителий был представлен 4-5 слоями плоских клеток. Передняя пограничная мембрана дифференцировалась на всем протяжении. Собственное вещество роговой оболочки содержало компактно расположенные коллагеновые волокна с нормальными тинкториальными свойствами. Задняя пограничная мембрана хорошо визуализировалась на всем протяжении и была гомогенна (рис. 4). Эндотелий представлял собой слой отростчатых клеток. У животных группы сравнения в переднем эпителии сокращалось число клеток с признаками баллонной дистрофии – 1,8±0,17 клеток в поле зрения, вследствие чего уменьшалась толщина переднего эпителия до 25,7±0,7 мкм. Площадь тканевых щелей в строме роговицы между волокнами коллагена составляла 485±79 мкм2, что свидетельствовало об уменьшении степени гидратации. Однако число новообразованных сосудов увеличилось (рис. 5). Эндотелий представлял собой слой дистрофически изменённых клеток.

    Обсуждение

     Биологическая роль мононуклеаров определяется их функциональной гетерогенностью, включающей фагоцитарные, регенераторные и эффекторные свойства, способность секретировать многочисленные продукты метаболизма, опосредующие функции данных клеток [4, 8]. Подтверждением этому служит возможность разделения клеточной популяции на фракции и субклассы, отличающиеся по своим свойствам. Среди мононуклеаров крови присутствуют также клетки гемопоэтичной и мезенхимальной линии различной степени дифференцировки. Однако, несмотря на гетерогенность мононуклеаров, неизменным остается их свойство функциональной полипотентности, т.е. способности реализовывать различные потенции генома в зависимости от регуляторного воздействия микроокружения.

    Можно предположить, что мононуклеары крови после введения в переднюю камеру экспериментальных животных основной группы и наслоения на внутреннюю поверхность роговой оболочки адгезируются к десцеметовой оболочке, причем в данном случае, по всей видимости, имеет место гиперадгезивность – усиление физиологической функции, сопряженное с реактивной перестройкой клеток под влиянием стимулов из микроокружения.

    Адгезированные к внутренней поверхности роговицы мононуклеары оказываются на пути циркулирующей в определенном направлении внутриглазной жидкости. Наличие направленного движения жидкости через мононуклеарные клетки вызывает в них биохимические и морфологические изменения [4].

    Как известно, изменения внутриклеточного гомеостаза и гемокинеза сопряжены с процессами блокирования – деблокирования различных наборов генов на субклеточном уровне. Изменение же экспрессии генов и репрограммирование генома клеток непосредственно связаны с процессом их дифференцировки. Возможно, активация генов, обусловленная внутриклеточными биохимическими сдвигами, инициирует в одной из фракций мононуклеаров реализацию определенной дифференцировочной программы [4]. В результате часть аутологичных мононуклеаров крови, адгезированных к внутренней поверхности роговицы, при модулирующем влиянии направленного движения внутриглазной жидкости дифференцируются в эндотелиоциты, которые постепенно в виде монослоя выстилают изнутри заднюю поверхность роговой оболочки.

    Заключение

    В эксперименте in vivo установлено, что внутрикамерное введение аутологичных мононуклеаров крови с последующим их наслоением на внутреннюю поверхность роговой оболочки при ЭЭД способствует регенерации эндотелиального слоя, благодаря чему компенсируется его нарушенная функция, и, как следствие, уменьшается отек слоев роговицы и восстанавливается ее прозрачность.


Страница источника: 234-238

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru