Online трансляция


18-й Всероссийский конгресс катарактальных и рефракционных хирургов с международным участием
Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии
Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии
Москва
20-21 октября 2017 г.

Партнеры


Valeant thea
Allergan Фокус
santen tradomed
sentiss



Издания


Российская офтальмология онлайн Российская
Офтальмология Онлайн

№ 26 2017
№ 25 2017
№ 24 2017
№ 23 2016
№ 22 2016
...
Журнал Офтальмохирургия Журнал
Офтальмохирургия

№ 3 2017 г.
№ 2 2017 г.
№ 1 2017 г.
№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
...
Журнал Новое в офтальмологии Новое в
офтальмологии

№ 2 2017 г.
№ 1 2017 г.
№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
...
Российская детская офтальмология Российская
детская офтальмология

№ 2 2017
№ 1 2017
№ 4 2016
№ 3 2016
...
Современные технологии в офтальмологии Современные технологии
в офтальмологии

№ 5 2017
№ 4 2017
№ 3 2017
№ 2 2017
...
Восток – Запад Восток - Запад.
Точка зрения

Выпуск 4. 2017
Выпуск 3. 2017
Выпуск 2. 2017
Выпуск 1. 2017
...
Новости глаукомы Новости
глаукомы

№1 (41) 2017
№1 (37) 2016
№1 (33) 2015

....
Мир офтальмологии Мир офтальмологии
№3 (35) Август 2017
№2 (34) Май 2017
№1 (33) Март 2017
№ 6 (32) Декабрь 2016
№ 5 (31) Октябрь 2016
....


facebooklogo     youtubelogo



Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Ангиогенный потенциал мультипотентных стромальных клеток орбитальной жировой ткани


1МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава РФ

    Актуальность

     Известно, что в жировой ткани, заполняющей пространство между костными стенками глазницы и ее содержимым, подобно подкожной и висцеральной жировой ткани туловища, содержатся мультипотентные стромальные клетки (МСК) [1, 4]. За последние годы орбитальные МСК подверглись активному изучению, и уже показаны разнообразные положительные терапевтические эффекты их применения [2, 7, 11], преимущественно не за счет терминальной клеточной дифференцировки, а вследствие способности к паракринной регуляции межклеточных процессов в тканях.

    Одним из направлений изучения секреторной способности орбитальных МСК является их влияние на результат восполнения объема глазницы при коррекции энофтальма путем введения препаратов гиалуроновой кислоты [5] или аутотрансплантации жировой ткани. Установлено, что значительную роль в приживлении жирового трансплантата играет ранняя васкуляризация [6]. Раннее было показано, что МСК, выделенные из жировой ткани туловища, экспрессируют такие ангиогенные и антиапоптотические факторы, как фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), фактор роста гепатоцитов, фактор роста фибробластов-2, ангиопоэтин-1, трансформирующий фактор роста-ß [3, 9, 10]. Однако данных о способности МСК жировой ткани глазницы секретировать подобные факторы нами не обнаружено.

    Цель

    Определить наличие секреции факторов ангиогенеза мультипотентными стромальными клетками, выделенными из орбитальной жировой ткани человека.

    Материал и методы

    Образцы орбитальной жировой ткани резецировали в ходе плановых реконструктивно-пластических операций по поводу врожденных и приобретенных патологических состояний глазного яблока и его придаточного аппарата. Выделение МСК из орбитальной жировой ткани человека проводили по ранее описанной методике [1], включающей механическое измельчение образца жировой ткани ножницами, ферментативное расщепление раствором коллагеназы и центрифугирование. После этого верхнюю жировую фракцию и осадок переносили в культуральный флакон. Культивирование на всем протяжении эксперимента проводили в среде DMEM/F12 с добавлением 2 ммоль L-глутамина (ПанЭко, Россия), 10% эмбриональной телячьей сыворотки и смеси антибиотиков (пенициллин 10000 МЕ/мл, стрептомицин 10000 мкг/мл, амфотерицин 25 мкг/мл; MPBiomedicals, LLC, США) в СО2-инкубаторе при температуре 370 С и 5% СО2 в атмосфере. Смену среды проводили на вторые сутки (при этом удалялись осевшие эритроциты и другие клетки стромально-сосудистой фракции, а также фрагменты жировой ткани); далее среду меняли каждые 3-4 дня.

    Для определения секреции орбитальными МСК факторов VEGF A и TGF-ß2 проводили забор образцов культуральной жидкости на 2-е и 5-е сутки (через 72 часа после первой смены среды) перед сменой питательной среды на свежую аналогичного состава. До проведения анализа образцы хранили в эппендорфах при температуре -800 С.

    Количественную оценку содержания факторов ангиогенеза в образцах культуральной среды проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа (коммерческие наборы «Human VEGF-A Platinum ELISA» (eBioscience), «набор для иммуноферментного анализа трансформирующего ростового фактора ß2 человека», OOO «Альма-Бион») на ИФА-анализаторе для микропланшетов (Asys Hitech) при длине волны 450 нм.

    Статистический анализ данных проводили с помощью программы Statistica 8.0 (StatSoft, США). Проверку на нормальность распределения значений признака проводили с учетом критерия Колмагорова-Смирнова. В связи с ненормальным распределением значений признака данные представлены в формате (медиана; 1-й квартиль, 3-й квартиль). Для сравнения двух зависимых групп (концентрация фактора в динамике) использовали непараметрический критерий Вилкоксона, результаты считали статистически достоверными при р<0,05.

    Результаты

    В исследование вошло 18 культур орбитальных МСК, выделенных из фрагментов орбитальной жировой ткани 14 пациентов в возрасте 3-84 лет.

    По результатам иммуноферментного анализа VEGF A обнаружен в большинстве образцов культуральной жидкости уже на 2-е сутки. Его концентрация варьировала в широких пределах (количественные значения представлены в табл.), однако статистически достоверных различий в зависимости от возраста пациентов, локализации жировой ткани в глазнице и характера орбитальной патологии не обнаружено. При сравнении в динамике к 5-м суткам концентрация VEGF A нарастала в 4-х образцах, где первоначально данный фактор выявлен не был. В остальных образцах культуральной жидкости наблюдалось статистически достоверное снижение концентрации VEGF A (р=0,025).

    Иной профиль секреции наблюдался для TGF-ß2 в тех же клеточных культурах. На 2-е сутки в трех образцах культуральной жидкости определялись невысокие концентрации TGF-ß2, которые к 5-м суткам дополнительно снижались. Обращает на себя внимание, что двое из этих образцов представляли собой культуральную среду от МСК, выделенных из медиальной фракции орбитальной жировой ткани («белый» жир). В свою очередь, в пяти образцах из 15 первоначально негативных по TGF-ß2 на 5-е сутки зарегистрирована секреция данного фактора.

    Достоверных различий в количестве VEGF A и TGF-ß2 в культуральной среде в зависимости от возраста пациентов, характера орбитальной патологии, локализации жировой ткани в глазнице не обнаружено.

    Обсуждение

    Наблюдаемое снижение концентрации VEGF A к 5-м суткам культивирования орбитальных МСК может быть связано с особенностями используемого протокола выделения клеток. Так как после ферментативного расщепления и центрифугирования в культуральный флакон переносили не только стромально-васкулярную фракцию клеток, но и тканевой дебрис, это могло обусловить поступление дополнительных количеств данного фактора. В свою очередь, после первой смены культуральной среды на 2-е сутки не прикрепившаяся к пластику клеточная и тканевая масса удалялась, оставалась практически чистая культура орбитальных МСК. Именно результаты определения концентрации исследуемых факторов на 5-е сутки (т.е. через 72 часа после смены среды) отражают секреторную способность орбитальных МСК.

    Обращает на себя внимание нарастание концентрации TGF-ß2 к 5-м суткам культивирования орбитальных МСК.

    Известно, что белки семейства TGF-ß экспрессируются в культуре адипоцитов, в жировой ткани и тормозят дифференцировку преадипоцитов [8]. В то же время TGF-β1 способен индуцировать экспрессию фактора роста эндотелия сосудов, являющегося основным ангиогенным фактором, регулирующим рост новых кровеносных и лимфатических сосудов [12]. Таким образом профиль и механизмы регуляции секреции ангиогенных факторов орбитальными МСК требуют дальнейшего уточнения.

    Выводы

    Мультипотентные стромальные клетки, выделенные из орбитальной жировой ткани человека, в условиях in vitro секретируют фактор роста эндотелия сосудов и трансформирующий ростовой фактор-β. Это свидетельствует об их потенциальной способности регулировать ангиогенез в тканях глазницы, что может играть положительную роль при аутотрансплантации жировой ткани в глазницу.

    Необходимо дальнейшее детальное изучение профиля секреции этих и других ангиогенных факторов с целью разработки тактики направленного терапевтического ангиогенеза тканей глазницы.


Страница источника: 19-22

Сателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенациональн...

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru