Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Первый опыт определения микробиоценоза глазной поверхности методом газовой хромато-масс-спектрометрии


1Многопрофильный медицинский холдинг «СМ-клиника»

    Актуальность

     Заболевания глазной поверхности занимают лидирующее место в структуре офтальмопатологии и имеют тенденцию к росту, что связано со многими факторами, в числе которых распространенность и контагиозность острых воспалительных заболеваний глаз, самолечение пациентов, неконтролируемое местное применение антибиотиков и гормональных препаратов, изменение экологии, условий труда и отдыха [1, 2, 4, 9].

    Этиология длительно текущих хронических заболеваний глазной поверхности часто остается неизвестной из-за низкой вероятности высева микробов из мазков, что связано с тем, что по существу организации микробной биопленки в мазках может содержаться лишь выведенный на поверхность с разложенным мукозом микробный дебрис или нежизнеспособные клетки [1, 3, 6]. Отсутствие объективного представления об этиологии заболевания ведет к назначению неэффективных лекарственных препаратов, длительному течению заболеваний и повышению риска развития осложнений [5, 7, 10]. В связи с этим остается актуальным вопрос о поиске высокоинформативного метода определения этиологии воспалительного процесса [3, 4, 7].

    Благодаря появлению метода детектирования микроорганизмов по нелетучим жирным кислотам клеточной стенки микроорганизмов методом газовой хроматографии – масс-спектрометрии (ГХ-МС) – создается возможность качественно и количественно оценить микробиоценоз глазной поверхности и индивидуально подобрать эффективную этиологическую и патогенетическую терапию [3, 5-7, 14]. Метод основан на использовании больших баз данных, содержащих сведения о составе жирных кислот нескольких тысяч штаммов бактерий и микроскопических грибов [3, 5, 7]. Метод ГХ-МС около 15 лет проходил апробацию в медицинских учреждениях Москвы и в 2010 г. его применение в качестве новой медицинской технологии было разрешено Росздравнадзором на территории Российской Федерации – «Оценки микроэкологического статуса человека методом хромато-масс-спектрометрии» (разрешение ФС от 24.02.2010 г. № 2010/038).

    Цель

    Оценить микробиоценоз отделяемого глаз методом ГХ-МС у пациентов с хроническими заболеваниями глазной поверхности.

    Материал и методы

    Был проведен анализ результатов исследования состава микробных маркеров в отделяемом глаз методом ГХ-МС у 50 пациентов с хроническими заболеваниями глазной поверхности, из них 22 мужчины и 28 женщин в возрасте от 20 до 78 лет (средний возраст 43,5±6,15 года), которые обратились в клинику с января по март 2016 г. Все пациенты ранее проходили курсы консервативного лечения воспалительных заболеваний глаз в других клиниках и не были удовлетворены результатами.

    Пациенты были разделены на 3 группы по основным клиническим проявлениям заболевания: в группу I вошли 20 пациентов с хроническим конъюнктивитом, в группу II вошли 24 пациента с хроническим блефароконъюнктивитом, в группу III вошли 6 пациентов с кератоконъюнктивитом. Всем пациентам было проведено офтальмологическое обследование, включающее визометрию, авторефрактометрию, бесконтактную тонометрию, переднюю и заднюю биомикроскопию, по показаниям проводилась проба Ширмера, флуоресцеиновая инстилляционная проба, диагностическое промывание слезных путей. Для исследования у каждого пациента осуществлялся забор отделяемого конъюнктивальной полости одного из глаз с более выраженными клиническими проявлениями заболевания при помощи стерильного зонда с ватным наконечником в пробирку без среды. Проводилось исследование материала методом ГХ-МС на наличие 57 микроорганизмов, концентрация которых определялась по молекулярным маркерам в лаборатории медицинского холдинга «СМ-Клиника».

    Результаты и обсуждение

    Микроорганизмы, выявленные в отделяемом глаз 50 обследованных пациентов с хроническими заболеваниями глазной поверхности, указаны в табл. Существенные (более чем в 2 раза) отклонения в численности колонизации претерпевают многие микроорганизмы – 27 из 57. Особенно часто увеличивается концентрация Staphylococcus aureus – в 49 из 50 глаз (98%), Streptomycess spp. – в 45 из 50 глаз (90%), Blautia coccoides – в 45 из 50 глаз (90%), Peptostreptococcus anaerobus – в 44 из 50 глаз (88%), Streptococcus mutans – 43 из 50 глаз (86%), Str.pneumonia – в 43 из 50 глаз (86%), Streptococcus spp. – в 31 из 50 глаз (62%), Clostridium perfringens – в 25 из 50 глаз (50%); из грибов и дрожжей – Aspergillus spp – в 19 из 50 глаз (38%), Candida spp. – в 9 из 50 глаз (18%). При этом в каждом анализе наблюдался существенный рост численности колонизации от 4 до 16 видов микроорганизмов.

    Однако основной тенденцией хронических заболеваний глазной поверхности является уменьшение численности большинства микроорганизмов – 34 из 57 контролируемых, более чем в 50% случаев, причем в каждом отдельном случае уменьшение составляло от 11 до 23 видов микроорганизмов. Отмечалось сокращение численности Eubacterium spp. в 50 из 50 глаз (100%), Bifidobacterium spp. в 50 из 50 глаз (100%), Lactobacillus spp. в 50 из 50 глаз (100%), микроорганизмов, относящихся к энтеробактериям, в 50 из 50 глаз (100%), Staphylococcus epidermidis в 45 из 50 глаз (90%), Prevotella spp. в 41 из 50 глаз (82%), а так же микроорганизмов, относящихся к аэробным актинобактериям Nocardia asteroids в 50 из 50 глаз (100%), Rodococcus spp. в 50 из 50 глаз (100%), Actinomyces spp в 45 из 50 глаз (90%), Actinomyces viscosus в 43 из 50 глаз (86%). Отсюда следует, что причиной хронических заболеваний глазной поверхности является не определенный инфекционный агент, а скорее неспецифические изменения нормальной микрофлоры конъюнктивы. Как видно из табл., при хроническом конъюнктивите, блефароконъюнктивите и кератоконъюнктивите наблюдаются схожие изменения. Большинство перечисленных микроорганизмов являются естественными обитателями глазной поверхности, поэтому в пределах чувствительности метода (в данном случае 10 5 кл/мл) фактически наблюдается изменение количественного состава микроорганизмов, колонизирующих в норме глазную поверхность, что является признаком дисбиоза [7, 10, 16].

    Случаи более чем двукратного превышения нормы (>2 N) численности микроорганизмов в отделяемом глаз и уменьшения их численности более чем вдвое (<0,5 N) были отмечены во всех трех исследуемых группах. Полученные данные свидетельствуют о дисбиозе при хроническом конъюнктивите, блефароконъюнктивите и кератоконъюнктивите, который отмечают в своих исследованиях и другие авторы [11-13, 15]. Во всех группах отмечался выраженный дефицит доминирующих представителей нормальной микрофлоры: Bifidobacterium spp., Eubacterium spp., Lactobacillus spp., Propionebacterium freudenreichii, что заставляет задуматься о целесообразности разработки препаратов, восстанавливающих нормальную микрофлору конъюнктивальной полости у пациентов, перенесших длительное лечение антибиотиками.

    Тактика дальнейшего лечения каждого пациента определялась индивидуально по результатам полученного анализа отделяемого одного из глаз, с учетом чувствительности микроорганизмов к антибиотикам и фармакологических свойств лекарственных препаратов [8, 9]. Лечение все пациенты получали бинокулярно в связи с наличием схожих клинических проявлений заболевания на парном глазу. В 19 случаях из 50 потребовалась местная противогрибковая терапия в связи с выявленным клинически значимым превышением численности (более чем в 2 раза по сравнению с нормой) Candida spp. и Aspergillus spp.: 8 пациентов из группы I (40%), 9 пациентов из группы II (37,5%) и 2 пациента из группы III (33,3%). Подбор антибактериальной терапии осуществлялся, исходя из фармакологической активности лекарственных препаратов по отношению к выявленным микроорганизмам, и потребовался лишь в 18 случаях из 50 (36%). В 24 случаях из 50 (48%) применялись местно только антисептические препараты в связи с ростом малого числа патогенных микроорганизмов и их высокой чувствительнотью к антисептикам. А в 8 случаях из 50 (16%) противомикробной терапии не потребовалось – пациенты получали неспецифическое противовоспалительной лечение и слезозаместительную терапию, данные пациенты относились к группе I. Лечение пациентов с хроническими заболеваниями глазной поверхности, согласно полученным данным при анализе отделяемого глаза, было высокоэффективно во всех исследуемых группах, позволило достигнуть ремиссии у 42 пациентов (84% случаев).

    Заключение

    При хронических заболеваниях глазной поверхности состав микробиоты отличается от нормы: во всех исследуемых группах отмечается увеличение концентрация Streptococcus spp., Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, Blautia coccoides, Str.pneumonia, Clostridium perfringens, Peptostreptococcus anaerobus, Streptomycess spp., Aspergillus spp, Candida spp. и снижение концентрации Staphylococcus epidermidis, Bifidobacterium spp., Eubacterium spp., Lactobacillus spp., Prevotella spp., а также микроорганизмов, относящихся к аэробным актинобактериям и энтеробактериям. Количественный и качественный анализ микробиоценоза глазной поверхности методом ГХ-МС дает возможность выбора эффективных препаратов для консервативного лечения. Целесообразно дальнейшее исследование микробиоценоза глазной поверхности для получения статистически достоверных данных о закономерностях развития дисбиоза.


Страница источника: 166-171
Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

«Живая» хирургия в рамках XVI Всероссийской конференции с международным участием «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии»«Живая» хирургия в рамках XVI Всероссийской конференции с ме...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Секундо В. Трансплантация рефрактивной лентикулы  используя VisuMax как способ лечения осложнений операции Lasik. ВидеопрезентацияСекундо В. Трансплантация рефрактивной лентикулы  используя ...

Симпозиум компании «Алкон» с демонстрацией показательных операцийСимпозиум компании «Алкон» с демонстрацией показательных операций

Осложненная катаракта: особенности хирургии и фармакотерапииОсложненная катаракта: особенности хирургии и фармакотерапии

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии XVI Всероссийская конференция с  международным участием Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Бактериальные инфекции глаза: взгляд офтальмолога и офтальмохирургаБактериальные инфекции глаза: взгляд офтальмолога и офтальмо...

Офтальмология: диагностика проблем, пути решенияОфтальмология: диагностика проблем, пути решения

Глаукома:теория и практика. Новый взглядГлаукома:теория и практика. Новый взгляд

Актуальные вопросы в лечении и профилактике ВМДАктуальные вопросы в лечении и профилактике ВМД

Современные аспекты и новые возможности ОКТСовременные аспекты и новые возможности ОКТ

Патология глазной поверхности и глаукома. Новые возможности и новые перспективы в решении «старых» проблемПатология глазной поверхности и глаукома. Новые возможности ...

Новейшие достижения в офтальмологииНовейшие достижения в офтальмологии

X Съезд офтальмологов России X Съезд офтальмологов России

Иммуномодулирующая и противовирусная терапия при лечении воспалительных заболеваний глаз различной этиологииИммуномодулирующая и противовирусная терапия при лечении вос...

«Нова Медика»: новые горизонты офтальмологии«Нова Медика»: новые горизонты офтальмологии

Рейтинг@Mail.ru