Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Экспериментальное исследование


1----------

    1 Характеристика экспериментальной группы

     Исследование проводилось на 45 кроликах мужского пола, линии Шиншилла, в возрасте 1 месяца, весом 800-900 грамм (рис. 1). Животные были получены из ФГУП ОПХ “Манихино” Истринского района Московской области (ветеринарное свидетельство 250 № 0220035) и содержались в виварии ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, за которыми осуществлялся строгий ветеринарный контроль сотрудниками вивария.

    Экспериментальное исследование было проведено в соответствии с “Международными рекомендациями (этический кодекс) по проведению медико-биологических исследований с использованием животных” [22] и с “Руководством по содержанию и использованию лабораторных животных” [70]. Проведение экспериментального исследования одобрено этическим комитетом ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова (протокол № 122 от 17.12.2012).

    2 Методика экспериментального исследования

    2.1 Описание экспериментальной модели

     Для создания экспериментальной модели неинвазивной дополнительной оксигенации кроликов был использован герметичный пластмассовый контейнер и кислородный концентратор (рис. 2).

    В качестве контейнера была применена пластмассовая коробка размером 52 х 36 х 35 см (объем 70 л) с крышкой, которая герметично фиксировалась на коробке защелками. На противоположных боковых сторонах коробки были вырезаны два отверстия диаметром 10 мм, в одном из которых была герметично закреплена силиконовая трубочка кислородного концентратора, а второе отверстие оставалось свободным для создания однонаправленного воздушного потока.

    С помощью кислородного концентратора New Life Intensity 10 (компания AirSep, США) через силиконовую трубочку в контейнер диффузно поступал кислород в определенной концентрации. Кислородный концентратор был откалиброван по следующим параметрам: концентрация кислорода – 40%, 60%, 85%, 98-99%; давление кислорода на выходе – от 1,38 до 2,12 атм; скорость воздушного потока – от 1 до 10 л/мин.

    Работа кислородного концентратора основана на методе адсорбции. С помощью воздушного компрессора атмосферный воздух прогоняется через две адсорбционные колонки, молекулярное сито которых поглощает азот и примеси. В результате на выходе скапливается кислород.

     Заявленная производителем концентрация кислорода на выходе составляет 93 ± 3%. Более низкие концентрации кислорода удалось получить с помощью дополнительного воздушного фильтра (рис. 3).

    Комбинации параметров концентратора кислорода и воздушного фильтра для получения различных концентраций кислорода на выходе представлены в таблице 1.

    Животные помещались в контейнер на определенный период времени, в течение которого они свободно дышали диффузно поступающим кислородом без дополнительных специальных приспособлений (масок, трубок и т.д.). Контроль поступления и уровня кислорода в контейнере осуществлялся с помощью портативного кислородного анализатора PrО2 Check Elite® SLC-10313 (компания Salter Labs, США) (рис. 4-5). Данный кислородный анализатор представляет собой полярографический анализатор, в котором молекулы кислорода проходят через тефлоновую мембрану и электролитный раствор. Возникающий ток между серебряным катодом и платиновым анодом пропорционален парциальному давлению кислорода во вдыхаемом газе. Анализатор работает от батарей.

    2.2 Распределение животных на группы в зависимости от режима гипероксигенации

     В зависимости от продолжительности непрерывной гипероксигенации и концентрации кислорода во вдыхаемом воздухе кролики были распределены на 4 экспериментальные группы (таб. 2).

    В 1 группе животные получали гипероксигенацию в течение 1-го часа, во 2 группе – в течение 6-ти часов. Внутри первых двух групп были дополнительно сформированы по четыре подгруппы (A, B, C, D) в зависимости от концентрации кислорода во вдыхаемой смеси (40%, 60%, 85% и 99%). В этих двух группах забор проб производился у животных однократно - по окончании периода гипероксигенации.

    В 3 группе кролики дышали 60% кислородом в течение 24 часов, в 4 группе животные получали 99% кислород в течение 12 часов. После окончания гипероксигенации кролики обеих групп продолжали дышать атмосферным воздухом (21% кислорода) в течение еще 6 часов. Забор проб у животных этих групп проводился многократно: в начале, в середине и в конце периода гипероксигенации, а также спустя 1, 3 и 6 часов после окончания гипероксигенации.

    Контрольная группа состояла из 3 кроликов (6 глаз), дышавших атмосферным воздухом (концентрация кислорода – 21%).

    Необходимо отметить, что для чистоты эксперимента забор проб артериальной крови и СТ у одного животного производился единовременно и только 1 раз.

    3 Техника забора экспериментального материала

     Во время проведения исследования животные находились в условиях, исключающих болевую травму или иные неудобства (общее обезболивание).

    В качестве анестезиологического пособия применялся раствор золазепама в дозе 10 мг/кг массы тела внутримышечно (общая анестезия) и 0,4% раствор инокаина эпибульбарно (дополнительная местная анестезия).

    После установки векорасширителя конъюнктивальная полость обильно промывалась раствором окомистина (рис. 6). Забор проб стекловидного тела (в объеме 0,2 мл) осуществлялся путем аспирации в одноразовый стерильный шприц объемом 1 мл через прокол склеры в 3-4 мм от лимба (рис. 7).

    Забор проб артериальной крови (в объеме 0,3 мл) осуществлялся путем пункции общей сонной артерии с помощью одноразовых стерильных шприцев объемом 2 мл.

    Для доступа к общим сонным артериям голова и шея животных отводились в дорзальном направлении с максимальным разгибанием затылочно-атлантного сустава. Пульсация общей сонной артерии определялась пальпаторно в задней трети яремного желобка, находящегося в проекции шестого шейного позвонка.

    4 Методика лабораторного анализа экспериментального материала

     Лабораторный анализ полученных образцов стекловидного тела и артериальной крови производился с помощью портативного газоанализатора Radiometer ABL80 FLEX (компания Radiometer, Дания). В полученных образцах стекловидного тела и артериальной крови без доступа воздуха при температуре 37°С немедленно производилось определение парциального давления кислорода (pO 2 ), единицы измерения – мм.рт.ст. (рис. 8-9).

    Парциальное давление кислорода измеряется амперометрическим методом с помощью мембранных платиновых электродов (типа Clark). Кончик электрода для определения pO2 с платиновым катодом и серебряным анодом окружен раствором электролита и покрыт полупроницаемой тефлоновой мембраной. Батарея в усилителе подает постоянное поляризационное напряжение на платиновый катод. Когда электрод помещается в исследуемую пробу, молекулы кислорода, проходя через мембрану, оседают на катоде и возникает поляризационный ток. Этот ток усиливается электрометрическим усилителем, где индикатором служит стрелочный прибор, градуированный в миллиметрах ртутного столба. Ток восстановления кислорода пропорционален концентрации растворенного кислорода.

    После завершения эксперимента ни одно животное не пострадало физически или психически. Животные были переданы сотрудникам вивария, где они продолжили свое существование.


Страница источника: 44

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru