Online трансляция


Научно-практическая конференция с международным участием
Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий
Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий
Москва. Гостиница Holiday Inn Sokolniki
4 февраля 2017 г.



15-я Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием
Современные технологии лечения витреоретинальной патологии
Современные технологии лечения витреоретинальной патологии
Сочи, 16-17 марта 2017
Официальный сайт

Партнеры


Valeant thea
Allergan Фокус
santen tradomed
sentiss



Издания


Российская офтальмология онлайн Российская
Офтальмология Онлайн

№ 22 2016
№ 21 2016
№ 20 2015
№ 19 2015
№ 18 2015
...
Журнал Офтальмохирургия Журнал
Офтальмохирургия

№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
№ 2 2016 г.
№ 1 2016 г.
...
Журнал Новое в офтальмологии Новое в
офтальмологии

№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
№ 2 2016 г.
№ 1 2016 г.
...
Российская детская офтальмология Российская
детская офтальмология

№ 4 2016
№ 3 2016
№ 2 2016
№ 1 2016
...
Современные технологии в офтальмологии Современные технологии
в офтальмологии

№ 5 2016
№ 4 2016
№ 3 2016
№ 2 2016
...
Восток – Запад Восток - Запад.
Точка зрения

Выпуск 4. 2016
Выпуск 3. 2016
Выпуск 2. 2016
Выпуск 1. 2016
...
Новости глаукомы Новости
глаукомы

№1 (41) 2017
№1 (37) 2016
№1 (33) 2015

....
Мир офтальмологии Мир офтальмологии
№ 6 (32) Декабрь 2016
№ 5 (31) Октябрь 2016
№ 3 (29) Июнь 2016
№ 2 (28) Апрель 2016
№ 1 (27) Март 2016
....


Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

1.3.Многоклеточные сфероидные микроагрегаты (сфероиды) как форма трансплантата


1----------

    Со времен разработки методов поддержания жизнеспособности клеток и тканей многоклеточного организма in vitro, т.е. методов культивирования, клеточные культуры вели наиболее простым и доступным образом - на поверхности плоских субстратов – чашек Петри, культуральных матрасов, культуральных планшетов и др. Делящиеся и разрастающиеся на плоскости клетки имеют, преимущественно, две степени свободы (2D) – слой клеток потенциально неограниченно разрастается в горизонтальной плоскости субстрата. Свобода в третьем измерении – по толщине – ограничивается пределами монослоя у большинства зрелых соматических клеток, у высокопролиферирующих клеток толщина 2D культуры может составлять 2-3 слоя. В 2D культурах раковых клеток толщина может достигать 5-6 слоев, а в эксклюзивных условиях постоянного тока питательной среды – 17 слоев [157]. Иначе дело обстоит с микроскопическими трехмерными (3D) культурами клеток, рост которых ограничивается естественным образом, согласно законам диффузии. Эукариотические клетки многоклеточного организма, имея три равноценные степени свободы при отсутствии субстратов проявляют тенденцию к агрегации с активным установлением межклеточных контактов и образованием микроструктур с минимальным отношением поверхность/объем, т.е. сферических [88].

    Феномен спонтанного образования трехмерных (3D) клеточных агрегатовin vitro берет свое начало с экспериментов по «диссоциации» целого организма и «регенерации» его из разрозненных клеток у кишечнополостных [284, 94]. Holtfreter J, изучая гаструляцию, обнаружил явление самосборки диссоциированных клеток эмбриона у амфибий [118, 272], Moscona A – у клеток эмбриона млекопитающих [196, 197]. Steinberg MS получил соагрегаты клеток сетчатки и хондрогенного зачатка конечности эмбриона млекопитающих [253].

    В 1971 году появляются первые сообщения о том, что опухолевые клетки в суспензионной культуре способны к спонтанному формированию округлых многоклеточных микроагрегатов – «сфероидов» [262, 69, 245]. По характеру роста сфероиды напоминали культивируемые узловые экспланты опухолевой ткани. В сфероиде наблюдалось функциональное разделение клеток, соответственно их локализации – поверхностные слои содержали большое количество митотирующих клеток, имеющих признаки эпителия, а клетки внутреннего, гипоксигенированного, слоя находились в состоянии покоя. Сфероиды опухолевых тканей проявляли тенденцию к росту и соответствующему усугублению гипоксии с образованием некротического очага в ядре сфероида, что и является механизмом саморегуляции роста сфероида [262, 88, 89]. Было продемонстрировано, что некрозу подвергаются клетки, находящиеся на глубине свыше 150-200 мкм от поверхности сфероида [88]. По сей день наибольшее количество исследовани й с применением сфероидных техник относится к области онкологии [199, 159, 102].

    Davis JC были получены первые клеточные агрегаты дифференцированных клеток тестикул взрослых мышей [70]. Полученные сфероиды достигали максимальных размеров к 4 суткам и, в отличие от опухолевых агрегатов, далее не увеличивались. Внутри сфероиды имели полость, выстланную клетками Сертоли, т.е. представляли собой микроткань.

    К настоящему моменты получены сфероиды из других высокодифференцированных тканей - гепатоцитов [238, 149], хондроцитов [230, ], фибробластов [263], гладкомышечной ткани [42], костной ткани [140], полых сфероидов (микрофолликулов) щитовидной железы [271], периферической крови [241], костного мозга [151], ряда эпителиальных тканей – эпителия щитовидной железы [95, 200], носовой полости [49], носоглотки [48], двенадцатиперстной кишки [47], печеночных протоков [153], поджелудочной железы [114], простаты [165], дыхательных путей [213], а также гибридных, «гетеро-сфероидов» из клеток разных типов [264, 152, 251].

    В офтальмологической литературе представлены публикации по исследованию сфероидов из эпителия хрусталика [144], клеток трабекулярной сети [189], кератоцитов роговицы [292, 92], РПЭ [207, 234, 26, 96, 235] а также имеются работы, в которых «сфероидом» или «микроагрегатом» называется псевдозамкнутый фрагмент сетчатки, полученный в ротационной культуре ткани [4, 167, 104, 229]. Причем, все известные к настоящему моменту работы, так или иначе связанные с изучением сфероидов, построенных из клеток глаза, являются экспериментальными.

    Одним из молодых направлений в современной трансплантологии является трансплантация клеточного материала в форме сфероидов, которые рассматриваются как удобные «строительные блоки» для de novo синтезируемых тканей [173, 174]. Известны примеры экспериментальной трансплантации сфероидов гепатоцитов («искусственная печень») [129, 91], сфероидов синовиального эпителия в ткань хряща для лечения ревматоидного артрита [81], сфероидов эпителия умбиликальной вены и сфероидов пуповинной крови в ишемизированную мышечную ткань [36, 37], сфероидов стволовых клеток жировой ткани для регенерации хряща [291] и при ишемии миокарда [145], сфероидов эпителия сосочкового слоя кожи [121].

    Характер межклеточных взаимодействий клеток внутри сфероида защищает их от апоптоза [153] и делает более устойчивыми к разрушению ионизирующей радиацией, гипертермией, ультразвуком и химиотерапевтическими агентами [79, 78, 162, 283], что было объяснено изменениями функции клеточных сигнальных систем в клетках, объединенных в сфероид [188, 208, 101]. В отличие от 2D культур, эпителиальные клетки наружных слоев сфероида образуют конгломерат, имеющий признаки естественной тканевой морфологии – полярности клеток, плотных межклеточных контактов, десмосом и мембранных вдавлений [48]. Так же как и в сфероидах опухолевых клеток, в сфероидах дифференцированных клеток наблюдается разделение по слоям – поверхностные клетки проявляют эпителиальный фенотип, а центральные – мезенхимальный [173].

    С точки зрения процессов клеточного движения имплантированные сфероиды в толще ткани проявляют эффекты спраутинга (sprouting, выпускание отростков в разные стороны) [137, 251, 252], а на плоской поверхности – эффект спрединга (spreading, распластывание с образованием клеточного слоя) [149, 288, 17].

    Размеры самых крупных сфероидов опухолевых клеток не превышают 3-4 мм, сфероидов зрелых дифференцированных клеток – не более 1 мм [88, 159], что потенциально позволяет использовать современные микрохирургические инструменты для инъекции сфероидных микроагрегатов в область интереса.

    Таким образом, трансплантация зрелого аллогенного РПЭ в форме сфероидов могла бы обладать рядом преимуществ, по сравнению с уже известными способами трансплантации РПЭ, к которым относятся:

    1. Микроинвазивность, как при имплантации клеток в суспензии.

    2. Ограничение самопроизвольной диссеминации клеток, как при имплантации лоскутов.

    3. Явление спрединга слоя клеток, аналогично наблюдаемому при имплантации фрагментов фетальной ткани.

    4. Морфологическое разделение клеток в составе сфероида позволяет преодолеть явление эпителиально-мезенхимальной трансформации.

    5. Допустимость экспериментального и клинического использования зрелого аллогенного материала в рамках действующего законодательства.

    Таким образом, анализ литературных источников показал, что в области трансплантации РПЭ имеются характерные проблемы, которые частично решались в процессе выполнения настоящего исследования.


Страница источника: 27
Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru