Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Результаты исследований


1----------

     Результаты исследований структуры и свойств имплантата в эксперименте in vitro

    Изображения СЭМ тестируемых имплантатов показали сложную пространственную организацию их микроструктуры: слоистое строение, соединение слоев поперечными сшивками, которые образуются из полимерной матрицы в ходе технологического процесса изготовления имплантата и расположены перпендикулярно к поверхности слоев. Размер одного слоя с поперечными сшивками составил около 10 микрометров.

    В результате проведенных экспериментальных исследований было установлено, что резорбция имплантата являлась следствием деструкции его полимерного остова. В течение всего срока исследования отмечали равномерное уменьшение размеров устройства с сохранением заданной формы и постепенным закруглением его краев. Исследования контроля резорбции показали постепенное уменьшение массы тестируемых имплантатов с течением времени, к 28-м суткам она составляла – 0,3 х 10 -3 г.

    На 32-е сутки имплантаты не были обнаружены в исследуемом растворе. На протяжении всего срока исследования каких-либо изменений цвета раствора, появления осадка, взвеси не обнаружено.

    Cпектрофотометрический анализ функции имплантата в качестве контейнера лекарственного вещества на примере дексаметазона подтверждал заданные характеристики его конструкции, предусматривающие профиль высвобождения препарата в течение 3-х суток с падением концентрации к середине 4-х суток (рис. 1).

    Цикл высвобождения лекарственного вещества повторялся 8 раз.

    Спустя 31 день активный агент высвобождался полностью. На основании вышеприведенных данных была установлена закономерность высвобождения ЛВ из имплантата. Данный процесс являлся предсказуемым и точным по продолжительности высвобождения: увеличение концентрации вещества в течение 3-х суток с пиком концентрации на 3-и сутки, латентный период – 1 сутки. Это достигалось за счет оригинальной конструкции имплантата, а именно: чередования насыщенных и ненасыщенных ЛВ слоев с заданными параметрами времени резорбции каждого слоя.

    Таким образом, биодеградируемый имплантат обладал рядом преимуществ: размеры и форма имплантата предусматривали его введение с помощью инструментов калибра 27 gauge; имплантат подвергался полной резорбции, что не требовало его последующего удаления из места введения; слоистая структура имплантата с наличием поперечных сшивок и возможность чередования слоев насыщенных и ненасыщенных ЛВ предотвращала возможность превышения терапевтической концентрации действующего вещества в растворе. В отличие от существующих биодеградируемых имплантатов, которые представляют собой монолитные полимерные конструкции с гомогенным распределением действующего вещества в матрице, характеризующихся непрерывным и неконтролируемым высвобождением активного агента, разработанный имплантат предотвращал избыточное выделение ЛВ за счет своей оригинальной многослойной конструкции.

    Результаты исследования биосовместимости, безопасности, биодеградации имплантата и профиля высвобождения дексаметазона in vivo

    После введения в переднюю камеру глаза кроликам 1-ой и 3-ей группы имплантаты оседали на поверхности радужной оболочки. Образцы занимали положение в нижней части передней камеры, при движении глазных яблок свободно перемещались. Резорбция имплантатов происходила в течение 31 -33-х дней. При офтальмоскопическом исследовании глазных яблок 1-ой и 3-ей опытной групп на всем протяжении эксперимента видимых изменений поверхности имплантатов обнаружено не было. В течение всего срока наблюдения отмечали постепенное уменьшение их длины, сглаженность краев. На 28-е сутки имплантаты имели овальную форму, уменьшены в размере – более, чем на ⅔ от исходной длины. К 33-м суткам имплантатов в передней камере глаза не было обнаружено.

    В одном из 10 глаз 1-ой группы на 7-е сутки отмечали фиксацию края имплантата к поверхности радужной оболочки у зрачкового края. Имплантат находился в нижней части передней камеры, при движении глазного яблока не смещался. Каких-либо воспалительных изменений внутриглазных структур, отложения фибрина, изменения структуры, цвета имплантата выявлено не было. В процессе динамического наблюдения резорбции данного имплантата отмечали постепенное уменьшение его размеров, с сохранением фиксации к поверхности радужки. На 21-е сутки принято решение о выведении данного кролика из эксперимента с целью морфологического исследования места фиксации имплантата.

    При биомикроскопии всех глаз кроликов 1- ой и 3-ей опытной, 1-ой и 3-ей контрольной групп в течение всего периода наблюдения отмечали прозрачность роговицы и влаги передней камеры, сохранялась живая реакция зрачка на свет, цвет и структура радужной оболочки не были изменены, хрусталик оставался прозрачным, глубжележащие среды и структуры глазного дна были без видимых патологических изменений. Ни в одном глазу первой группы не было выявлено воспалительной реакции, каких-либо изменений структур переднего сегмента глаза во время всего периода наблюдения.

    Морфологические исследования глаз 1-ой, 3-ей опытной и контрольной группы на протяжении всего эксперимента не выявили изменений структуры роговицы, радужки и цилиарного тела. При гистологическом исследовании глазного яблока кролика с фиксированным имплантатом на 21 -е сутки обнаружили срез имплантата с адгезией его к радужке, неполную биодеструкцию имплантата. В зоне контакта была обнаружена локальная реактивная воспалительная инфильтрация радужки без патоморфологических изменений других структур переднего сегмента глаза.

    При исследовании влияния ненасыщенного и насыщенного дексаметазоном имплантатов на структуры заднего сегмента глаза кролика во 2-ой и 4-ой группах сразу после интравитреального введения имплантаты определялись в передней трети СТ глаза кролика. На протяжении всего периода наблюдения происходила постепенная резорбция имплантатов в витреальной полости. При этом не обнаружили видимых изменений поверхности имплантатов, отмечали постепенное уменьшение их длины и сглаженность краев. На 33-е сутки имплантатов в СТ выявлено не было.

    Биомикроскопически в глазах контроля, 2-ой и 4-ой опытных и контрольной группах в 1-е сутки после интравитреального введения отмечали локальный отек конъюнктивы, незначительную смешенную инъекцию сосудов глазного яблока в месте склерального прокола, полностью проходившую на 3 сутки. В течение всего периода наблюдения видимых изменений структур переднего сегмента глаза, СТ и сетчатки отмечено не было. Снижение биоэлектрической активности сетчатки по данным ЭРГ выявили в опытных группах на 1-е сутки, что соответствовало таковым в контроле и свидетельствовало о незначительной реакции глаза на интравитреальное введение имплантатов. Через 1 месяц показатели биоэлектрической активности соответствовали нормальным значениям.

    Согласно результатам гистологического исследования структурных изменений и пролиферативных процессов со стороны сетчатки и других внутриглазных структур не отмечено.

    При определении профиля высвобождения дексаметазона из насыщенного имплантата в эксперименте in vivo c помощью метода ВЭЖХ его концентрация в 1-е сутки после интравитреального введения составила в среднем 136,8 ± 1,98 нг/мл. К 3-им суткам было отмечено увеличение концентрации препарата в СТ до 248,5 ± 3,04 нг/мл, на 7-е сутки она составила 190,0 ± 6,9 нг/мл. Значительное уменьшение уровня содержания дексаметазона в образцах выявлено на 14-е сутки - 48,6 ± 9,31 нг/мл. К 21-м суткам определяли повышение концентрации ЛВ в образцах до 218,5 ± 10,64 нг/мл. На 28-е сутки - снижение уровня содержания дексаметазона до 103,4 ± 8,48 нг/мл, а к 35-м суткам препарат не обнаружили в исследуемых образцах СТ. Полученные данные профиля высвобождения дексаметазона соответствовали о периодичности его выделения в лабораторных условиях.

    Повышение концентрации дексаметазона происходило в период растворения насыщенных ЛВ слоев, в то время как снижение концентрации дексаметазона на 14-е сутки объяснялось растворением ненасыщенного слоя. Лишь на 14-е сутки выявлено расхождение концентраций дексаметазона в растворе и исследуемых образцах СТ, что объяснялось наличием механизмов циркуляции внутриглазной жидкости и постоянным выведением вещества из витреальной полости глаза кролика.

    Таким образом, профиль высвобождения дексаметазона из насыщенного имплантата в условиях эксперимента in vivo подтвердил периодичность выделения ЛВ из изучаемого устройства, а также соответствие времени выделения препарата, заявленным характеристикам имплантата (в течение 33 дней).

    Результаты оценки эффективности функционирования насыщенного дексаметазоном имплантата на модели фотоиндуцированного тромбоза ветви ЦВС глаза кролика

    Согласно полученным результатам динамика уменьшения клинических проявлений тромбоза была более выражена в группе с введением имплантата по сравнению с группой, в которой проводили однократную интравитреальную инъекцию дексаметазона. Следует отметить, что в 1-е сутки в группе с интравитреальной инъекцией дексаметазона толщина сетчатки была меньше, чем в опытной группе, что объяснялось более высокой концентрацией препарата в витреальной полости. Уже к 3–им суткам в 1-й группе выявляли уменьшение количества геморрагий и отека сетчатки до 315 ± 8,4 мкм, в то время как во 2-й группе толщина сетчатки составила 344 ± 12 мкм. К 14-му дню наблюдения в опытной группе происходило разрешение отека, тогда как во второй группе в указанные сроки сохранялся отек сетчатки в области пораженной аркады, что было подтверждено данными ОКТ. Более выраженное уменьшение клинических проявлений тромбоза ветви ЦВС в опытной группе свидетельствовало о функционировании имплантата в качестве контейнера для доставки лекарственных препаратов и его способности к постепенному выделению действующего вещества. Конструкция имплантата позволяла предотвратить преждевременное выведение и инактивацию действующего агента и обеспечивала пребывание препарата в витреальной полости в достаточной концентрации для осуществления терапевтического эффекта.

    Таким образом, разработан имплантат для доставки лекарственных средств к структурам заднего сегмента глазного яблока. Данное устройство являлось биорезорбируемым инертным и биосовместимым, обладало способностью к периодическому высвобождению ЛВ, при котором периоды выделения препарата сменялись латентными периодами. В результате выделение лекарственного агента происходило через строго определенные промежутки времени, обеспечивая пролонгированное действие препарата в очаге поражения без превышения терапевтической концентрации и отсутствие побочных эффектов. Период полного растворения имплантата составил 33 суток.

    Анализ вышеприведенных результатов экспериментального исследования структуры и резорбции имплантата, процессов высвобождения препарата из имплантата, а также клинико-морфологических исследований свидетельствовал о безопасности интраокулярного введения ненасыщенного и насыщенного дексаметазоном имплантатов. Разработанный имплантат может быть использован в качестве носителя (резервуара) лекарственных средств. При этом заключение ЛВ в данную систему доставки обеспечивает интактность терапевтического агента до взаимодействия с пораженной тканью, предотвращает преждевременную деградацию вещества, позволяет осуществлять пролонгированное высвобождение лекарственного агента в необходимой дозе. Это обеспечит большую специфичность и эффективность лечения и позволит минимизировать нежелательные побочные эффекты.


Страница источника: 16

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru