Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Кросслинкинг как метод фиксации биосинтетического роговичного коллагенового имплантата


1----------

    Травмы и заболевания роговицы могут приводить к ее помутнению, что, в свою очередь, ведет к выраженному снижению зрительных функций. На сегодняшний день наиболее эффективным методом лечения помутнения роговицы является сквозная или ламеллярная кератопластика с использованием донорской ткани. Альтернативой донорскому трансплантату является искусственная роговица – кератопротез, его имплантируют больным, которым не показано использование донорского трасплантата.


    Недавно были разработаны биосинтетические роговичные имплантаты (БСРИ) – аналоги аллогенных трансплантатов. Отсутствие клеточного строения, прозрачность, роговицеподобная матрица, основанная на перекрестном связывании коллагена, делают использование БСРИ альтернативным методом лечения пациентов с патологией роговицы.


    Целью исследования доктора Wang с соавт. являлась оценка проведения кросслинкинга с облучением ультрафиолетовыми лучами-А (УФ-А) рибофлавина для фиксации БСРИ вместо наложения швов.


    Материал для изготовления БСРИ был изготовлен из рекомбинантного коллагена человека типа 3, перекрестно связанного с 1-этил-3-(диметиламинопропил) карбодиимидом и N-гидроксисукцинимидом. Некоторые из этих имплантатов были усилены включением 2-метакрилолоксиэтила фосфорилхолина. БСРИ имеют форму роговицы толщиной 350 мкм диаметром 12,0 мм. Для имплантации ex vivo имплантат выкраивали диаметром 6,0 мм или по форме, соответствующей роговичному ложу (рис. 1 А).


    
Рис. 2. А – Схема соответствия трансплантата роговичному ложу (как выявлено на изображениях, полученных с помощью ОКТ). Б – Схема соответствия трансплантата роговичному ложу (как показано на изображениях, полученных при гистологическом исследовании). В – Макроскопическое изображение имплантата, расположенного в роговичном ложе. Г – Расположение имплантата в роговичном ложе после проведения глубокой ламеллярной кератопластики с использованием эксимерного лазера (как показано на изображении, полученном при проведении ОКТ). Гладкий интерфейс указан маленькими стрелками. Д – Имплантат помещен в роговичное ложе глаза кролика после проведения глубокой передней ламеллярной кератопластики с использованием фемтосекундного лазера (как показано на изображении, полученном при проведении ОКТ). Выбухающий интерфейс указан маленькими стрелками. Е – Качественная адгезия имплантата к роговичному ложу видна при окрашивании образца. Ж – Проведение СЭМ показало структуру адгезии имплантата (параллельная ориентация коллагеновых волокон) и стромы роговицы
Рис. 2. А – Схема соответствия трансплантата роговичному ложу (как выявлено на изображениях, полученных с помощью ОКТ). Б – Схема соответствия трансплантата роговичному ложу (как показано на изображениях, полученных при гистологическом исследовании). В – Макроскопическое изображение имплантата, расположенного в роговичном ложе. Г – Расположение имплантата в роговичном ложе после проведения глубокой ламеллярной кератопластики с использованием эксимерного лазера (как показано на изображении, полученном при проведении ОКТ). Гладкий интерфейс указан маленькими стрелками. Д – Имплантат помещен в роговичное ложе глаза кролика после проведения глубокой передней ламеллярной кератопластики с использованием фемтосекундного лазера (как показано на изображении, полученном при проведении ОКТ). Выбухающий интерфейс указан маленькими стрелками. Е – Качественная адгезия имплантата к роговичному ложу видна при окрашивании образца. Ж – Проведение СЭМ показало структуру адгезии имплантата (параллельная ориентация коллагеновых волокон) и стромы роговицы
Гидрогели с концентрацией коллагена 10; 13,7; 15 и 18% разделили на 4 группы по 3 имплантата. В группе 1 на 0,1% изотонический раствор рибофлавина (10 мг рибофлавин-5-фосфата в 10 мл 12% раствора декстрана Е500) воздействовали УФ-А. В группе 2 перед воздействием УФ-А каждые 5 мин. выполняли аппликацию 0,1% гипотонического раствора рибофлавина. Группы 3 и 4 служили контролем: однократную аппликацию изотонического или гипотонического растворов рибофлавина выполняли в течение 5 мин., УФ-А не облучали. Толщину имплантата измеряли до и после лечения с помощью оптической когерентной томографии (ОКТ).


    БСРИ (n=35) были имплантированы ex vivo в 20 свиных и 15 кроличьих глаз, на которых провели глубокую переднюю ламеллярную кератопластику с помощью эксимерного лазера. На 6 свиных глазах и 5 глазах кроликов трепаном выкраивали роговичное ложе диаметром 6,0 мм, глубина которого на свиных глазах составляла 350 мкм, на глазах кроликов – 250 мкм. Эксимерным лазером формировали роговичное ложе на 7 свиных и 5 кроличьих глазах, фемтосекундным лазером – также на 7 свиных и 5 кроличьих глазах (рис. 1 Б).


    Для выполнения кросслинкинга УФ-А лучами (рис. 1В) изотонический раствор рибофлавина наносили на имплантат и строму роговичного ложа на 5 мин., чтобы раствор проник вглубь имплантата и остаточных слоев роговицы, после чего воздействовали УФ-А. После проведения кросслинкинга глаза исследовали с помощью биомикроскопии и ОКТ. Роговицы иссекали склеральными ножницами, помещали в 4% раствор формальдегида, затем – в парафин для проведения гистологического исследования после окрашивания различными красителями. Выполняли сканирующую электронную микроскопию (СЭМ). Образцы, на которые только наносили рибофлавин, служили контролем.


    При исследовании БСРИ с различным содержанием коллагена выявили, что у них различные степени сморщивания и толщина. После нанесения изотонического раствора рибофлавина без облучения УФ-А лучами отмечалось изменение толщины имплантата на 39% по сравнению с таковой до лечения. Применение гипотонического раствора рибофлавина значительно не уменьшало толщину имплантата.


    После облучения УФ-А БСРИ с изотоническим раствором в среднем толщина трансплантата снизилась на 52% по сравнению с толщиной до лечения. Аппликация гипотонического раствора рибофлавина с последующим облучением УФ-А лучами уменьшали толщину имплантата только на 8%. При наличии высокого содержания коллагена в БСРИ уменьшался эффект осмолярности рибофлавина, но происходило дополнительное сморщивание под воздействием УФ-А.


    Выполнение кросслинкинга приводило к образованию прочной адгезии имплантатов к роговичному ложу. Для более полного понимания процессов, происходящих при возникновении адгезии, были проведены гистологическое, томографическое и биомикроскопическое исследования (рис. 2 А-Е, маленькими стрелками указан интерфейс).


    Изменение толщины имплантата после проведения кросслинкинга отмечалось во всех образцах. Соответствие имплантата и роговичного ложа было более выраженным на глазах кроликов. В контрольных образцах (без проведения кросслинкинга) интеграции имплантат-роговичное ложе не наблюдалось.


    Проведенное исследование показало, что выполнение кросслинкинга является многообещающим методом бесшовной фиксации БСРИ. Анализ полученных данных выявил, что при проведении вмешательства в соответствии с новым методом в эксперименте обеспечивается образование прочной адгезии имплантата к роговичному ложу, исключается риск развития осложнений, связанных с наложением швов (образования помутнений, задержку эпителизации и иррегулярность поверхности).


    По мнению авторов, необходимо проведение дальнейших исследований для оценки влияния кросслинкинга на имплантат, обеспечивающего его стабильное положение в роговичном ложе. Кроме того, необходимо проанализировать отдаленные результаты предложенного вмешательства, а также изучить вопрос биосовместимости БСРИ после проведения кросслинкинга с тканями глаза in vivo.


    


    K. Wang, R. Neuhann, A. Ullmann, et al. Riboflavin-UV-A crosslinking for fixation of biosynthetic corneal collagen implants // Cornea. – 2015. – Vol. 34. – P. 544-549.


Страница источника: 10
Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru