Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Материал и методы исследования


1----------

    Исследование выполняли на базе ГБУ РО «КБ им. Н.А. Семашко» г. Рязани, ЦКБ РАН, ФГБУН ИБХ РАН им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова. Изучали НТГ, как форму ПОУГ, наиболее чувствительную к патогенным механизмам запуска апоптоза, проявляющимся в условиях статистически нормального ВГД. Пациентов отбирали по Протоколу. Критериями включения служили: впервые выявленная НТГ с уровнем ВГД Pt ≤ 25 мм рт. cт. (Po ≤ 21 мм рт.ст.), с признаками глаукомной оптической нейропатии, верифицированной периметрически (методом САП) и морфометрически (методом ОКТ), с открытым углом передней камеры (УПК), состоянием оптических сред глаза, позволяющих выполнить офтальмоскопию. Критерии исключения: иные формы оптической нейропатии, перенесенные оперативные вмешательства на глазу и травмы, инфекционные и аутоиммунные воспалительные заболевания глаза; системные заболевания: нейроэндокринные, воспалительные, аутоиммунные, сердечно-сосудистые, заболевания печени и почек, центральной и периферической нервной системы, некомплаентность пациента.

    Наблюдали 72 пациента с НТГ, из них: 10 мужчин (13,89%) и 62 женщины (86,11%) в возрасте от 48 до 84 лет (Мср.=65,2±1,3 года). Начальную стадию глаукомы верифицировали на 76 глазах, развитую – на 30, далеко зашедшую и терминальную – на 22; на 12 глазах установлена препериметрическая стадия глаукомы (ПГ). ПГ диагностировали на основании офтальмоскопических изменений диска зрительного нерва (расширенная экскавация, истончение нейроретинального пояска (НРП), перипапиллярная атрофия), отсутствии дефектов в поле зрения. Данные больных НТГ сопоставляли с данными группы контроля. Контролем служили 25 условно здоровых лиц (4 мужчины, 16%; 21 женщина, 84%) с сохранными зрительными функциями, нормальным офтальмотонусом (Po ≤ 21 мм рт.ст.), отсутствием глазных и системных аутоиммунных заболеваний, не имеющих родственников первой линии, страдающих глаукомой. Средний возраст пациентов в контроле составил 65,49±2,00. Группы были сопоставимы по гендерному распределению (p=0,7992) и возрасту (p=0,2432). Всем пациентам проводили офтальмологические и иммуномолекулярные исследования.

    Офтальмологическое исследование включало: визометрию, тонометрию, тонографию, пахиметрию, гониоскопию, биомикроскопию, офтальмоскопию, эхобиометрию, САП по программе 32 («Octopus 900»), ОКТ («Stratus OCT 3000»). Глаукому диагностировали по международным стандартам на основании клинических, периметрических и морфометрических данных. Начальную стадию верифицировали при: периметрическом индексе MD<6 дБ, снижении светочувствительности менее чем в 18 точках при достоверности Р<5% и менее чем в 10 точках при достоверности Р<1%; отсутствии точек с чувствительностью менее 15 дБ в центре (в 5° от точки фиксации). Развитой стадии соответствовало значение MD<12дБ, отсутствие абсолютных скотом (точек со светочувствительностью 0 дБ в центре), снижение светочувствительности меньше 15 дБ в центре только одной гемисферы поля зрения. Далеко зашедшая стадия верифицирована при МD≥12 дБ, наличии абсолютных скотом (точки со светочувствительностью 0 дБ в центральном поле зрения), снижении световой чувствительности менее 15 дБ в центре обеих гемисфер поля зрения (классификация Hodapp). Осуществляли поиск наиболее значимых и надежных критериев ранней диагностики НТГ. В ОКТ-диагностике, наряду с классическими морфометрическими показателями толщины сетчатки, параметрами ДЗН и НРП, анализировали асимметрию морфометрических параметров парных глаз на разных стадиях глаукомы, сравнивая с группой контроля. Использовали известный показатель асимметрии (ПА, в %). ПА высчитывали, как отношение асимметрии показателя ОКТ парных глаз к среднему значению этого параметра.

    Иммуномолекулярные исследования проводили методом иммуноферментного анализа (sandwich ELISA) на автоматизированной станции JANUS («PerkinElmer», USA) в лаборатории биокатализа (зав. лабораторией – член.корр. РАН проф. Габибов А.Г.). Объектом исследования служили: сыворотка (n=62) и слезная жидкость (n=124) больных с НТГ и лиц группы контроля (25 проб сыворотки, 40 проб слезы). Антитела (АТ) оценивали спектрофотометрически в условных единицах оптической плотности. Анализировали 9 аутоантител, исходя из их роли в антиапоптотической защите клетки на уровне цитоскелета (АТ к актину, α-фодрину, Tβ4), в метаболических – АТ к NSE, энолазе-1 (ENO-1), фотохимических – АТ к родопсину, α-кристаллину, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназе (GAPDH), демиелинизирующих реакциях (АТ к MBP), протекающих в тканях нейрональной дифференцировки, составляющих зрительный анализатор.

    Морфологические исследования выполняли в патологоанатомическом отделении ЦКБ РАН г. Москвы. Поиск и верификацию аутоАТ проводили в тканях 30 энуклеированных глаз с терминальной ПОУГ с помощью кроличьих антител аnti-IgG («Diagnostic Bio Systems», разведение 1:200) и системы детекции Specific HRP/AEC Detection IHC Kit («Abcam»). Определяли место ИГХ-окрашивания в клетке (ядро, цитоплазма, мембрана) и конкретную структуру/слой сетчатки, фиксирующую АТ. Иммунное картирование проводили на изолированной сетчатке и зрительном нерве, а также в структурах переднего отрезка глаза. Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета статистических программ SAS (Statistical Analysis System, SAS Institute Inc., США) с применением стандартных алгоритмов вариационной статистики, включая корреляционный анализ и анализ таблиц сопряженности, а также различные типы межгруппового сравнения параметров распределения показателей. Межгрупповые различия показателей рассчитывали методом t-критерия Стьюдента для независимых выборок. Корреляционную связь между показателями, измеренными по интервальной шкале, оценивали с помощью коэффициентов корреляции Пирсона, Спирмена и Tau-b Кендалла, а в случаях номинальной или ранговой шкалы – по таблицам сопряженности с расчетом нескольких модификаций критерия хи-квадрат, а также коэффициентов сопряженности и коэффициентов Крамера.


Страница источника: 7

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru