Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Результаты собственных исследований


1----------

     Для рентгенофлуоресцентного анализа (XRF) роговичные диски выкраивали при помощи корнеальных трепанов диаметром 7–8 мм. Затем при помощи трепана диаметром 2 мм выкраивали два сегмента (условно центральный и периферический в нижнем отделе роговицы) (рис. 1).

    Образцы подвергали эвапорации в беспылевой камере: температура – +20°C, относительная влажность – 65% и атмосферное давление – 1 атм. В качестве источника излучения использовали рентгеновскую медную трубку: ускоряющее напряжение на трубке – 30 кВ, экспозиция – 300 с.

    В центральной и периферической зоне роговичных дисков в норме выявлено наличие меди, цинка и железа. При КК в периферической зоне выявлено накопление меди, цинка, железа; в центральной зоне эти элементы отсутствовали. Содержание меди в периферической зоне при КК превышает норму в среднем в 20,6 раза, цинка – в 7,8 раза, железа – в 3,7 раза.

     Для энергодисперсионной рентгеновской спектроскопии со сканирующей электронной микроскопией (SEM-EDS) роговичные диски выкраивали при помощи корнеальных трепанов диаметром 7–8 мм и подвергали быстрому замораживанию в жидком азоте при температуре –195,75°C с последующей лиофилизацией при температуре –5°C и давлении в 50–60 Па. Через центральную зону роговичного диска был произведен косо-сагиттальный срез (рис. 2). На гистологическом срезе выделяли 5 субпараллельных профилей длиной 850 точек. На поверхности роговицы выделяли профиль, параллельный караю среза, длиной 1000 точек.

    Необходимый регистрируемый диапазон энергий рентгеновского спектра составлял 4,445–9,982 кэВ. В каждой точке получали спектр при ускоряющем напряжении 20 кВ, токе на образце 520 пА, в расширенном режиме давления EP и в режиме низкого вакуума, время экспозиции – 18 сек.

     Карты распределения, построенные по результатам интерполяции данных, показали, что в норме железо (рис. 3 A), медь и цинк распределены относительно равномерно в толще роговицы. При КК выявлено аномальное избыточное накопление железа, меди и цинка в передних слоях периферической зоны роговичного диска (рис. 3 Б, В и Г).

    Полученные результаты свидетельствует в пользу того, что кольцо Флейшера формируется в результате осаждения минеральных элементов на физико-химическом барьере (увеличение pH или Eh) в тканях роговицы.

    Недостаточность металлов и нарушение активности металлозависимых ферментов в центральной зоне роговицы ведут к эктазии из-за деструктивных процессов, сопровождающихся алкализацией среды и развитием оксидативного стресса (увеличение pH и Eh). В пределах предложенной схемы просматривается возможный «порочный круг» (рис. 4).

    Для электронно-зондового рентгеноспектрального анализа РСМА производили забор слезы при помощи микропипетки из зоны слезного ручья «в одно касание». Пробы высушивали в контейнере на токопроводящей углеродной пленке в беспылевых условиях при относительной влажности 85% и температуре +18°C до получения лиофилизата («кристаллограмма»). Далее пробы вакуумировали с целью их эвапорации. Изображения получали в отраженных электронах BSE, вторичных электронах SE и в режиме построения микротопограмм поверхности TOPO с последующим спектральным анализом и локальным элементным микрокартированием.

    Основными минеральными составляющими слезной жидкости являются хлор, натрий, калий и бор. Минеральные продукты представлены двумя твердыми фазами: с преимущественным содержанием хлорида калия и хлорида натрия (рис. 5). Логарифмическое весовое соотношение NaCl/KCl в норме и при КК составляет в среднем 5,6 и 5,3, с диапазоном 4,0–6,9 и 3,6– 7,7, соответственно. В норме в составе кристаллов хлорида калия концентрация бора варьировала 7,89–26,50 ат.%, в составе хлорида натрия 0,00–18,02 ат.%; при КК – 0,00–32,95 ат.% и 0,00–32,42 ат.%, соответственно.

    Наличие бора в слезе свидетельствует о том, что боратная буферная система на основе гидратированного тетраборат-аниона: 8 H3BO3 - 10 H2O + 2 H2B4O7 – может выступать в качестве составляющей механизма, поддерживающего нормальное кислотно-основное состояние слезы.

     Для изучения кислотности слезы в норме и при КК была разработана оригинальная методика pH-метрии. Забор слезной жидкости проводили лакмусовой тест-полоской (Сомов Е.Е., 1995; Connor A.J., Severn P., 2009; Stevens S., 2005) путем однократного касания конъюнктивы в средней трети нижнего свода. Использовали специальные индикаторные бумаги высокой чувствительности с возможным диапазоном измерений от 6,4 до 8,0 и интервалом 0,2 ед. pH (Macherey-Nagel, Германия). Разработанная оригинальная компьютерная программа «PHA» позволяет проводить колориметрическую оценку pH с точностью до 0,01 ед. pH (рис. 6). Оценку результатов осуществляли через 1–4 мин. после забора слезы.

    Слеза имеет выраженный гетерогенный характер и содержит в своем составе, как свободную слезную жидкость, так и более вязкий (слизистый) компонент. При этом pH вязкого компонента существенно выше по сравнению с этим параметром свободной слезной жидкости. При анализе проб здоровых пациентов в подгруппе А и пациентов с миопическим астигматизмом в подгруппе Б контрольной группы было выявлено наличие вязкого компонента слезы в 34 и 21 случае, соответственно.

    Сравнительный анализ показал, что кислотность свободной слезной жидкости у здоровых лиц не зависит от возраста (p > 0,05), тогда как кислотность вязкого компонента снижается с возрастом (r = –0,616, p < 0,05) (рис. 7). Кислотность свободной слезной жидкости у здоровых лиц имеет нормальное распределение Гаусса.

     Отсутствие отличий в распределении кислотности слезы между здоровыми добровольцами и пациентами с миопическим астигматизмом (p > 0,05) позволило объединить две субвыборки в одну единую контрольную группу (норма). В норме отсутствует связь кислотности слезы с латерализацией глаз, наличием вязкого компонента в пробах, половой принадлежностью, табакокурением и аллергоанамнезом (p > 0,05).

    При КК вязкий компонент слезы был обнаружен в 15 образцах.

    Кислотность вязкого компонента при КК в относительно молодом возрасте существенно ниже нормы и приближается к физиологической норме только с возрастом (r = –0,573, p < 0,05) (рис. 8). Распределение кислотности свободной слезной жидкости при КК носит полимодальный характер (рис. 9).

    При КК связь кислотности свободной слезной жидкости с результатами кератометрии, индексами иррегулярности роговицы и наличием кольца Флейшера отсутствует (p > 0,05). При КК была выявлена слабая положительная корреляционная связь между результатами кератопахиметрии и кислотностью свободной слезной жидкости (r = 0,263, p < 0,05).

     В табл. 3 представлены результаты pH-метрии слезы в норме и при КК.

    Осмометрия слезы пациентов с КК показала, что параметры осмолярности слезы остаются в пределах нормы. Результаты статистической обработки полученных данных свидетельствуют о возрастной изменчивости данного параметра (r = 0,526, p < 0,05) (рис. 10).

    Полученные данные согласуются с результатами, ранее проведенных исследований в отношении возрастной динамики осмолярности слезы: в норме происходит ее физиологическое повышение с возрастом (Craig J.P., Tomlinson A., 1998; Mathers W.D. et al., 1996).


Страница источника: 14
Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

«Живая» хирургия в рамках XVI Всероссийской конференции с международным участием «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии»«Живая» хирургия в рамках XVI Всероссийской конференции с ме...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Секундо В. Трансплантация рефрактивной лентикулы  используя VisuMax как способ лечения осложнений операции Lasik. ВидеопрезентацияСекундо В. Трансплантация рефрактивной лентикулы  используя ...

Симпозиум компании «Алкон» с демонстрацией показательных операцийСимпозиум компании «Алкон» с демонстрацией показательных операций

Осложненная катаракта: особенности хирургии и фармакотерапииОсложненная катаракта: особенности хирургии и фармакотерапии

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии XVI Всероссийская конференция с  международным участием Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Бактериальные инфекции глаза: взгляд офтальмолога и офтальмохирургаБактериальные инфекции глаза: взгляд офтальмолога и офтальмо...

Офтальмология: диагностика проблем, пути решенияОфтальмология: диагностика проблем, пути решения

Глаукома:теория и практика. Новый взглядГлаукома:теория и практика. Новый взгляд

Актуальные вопросы в лечении и профилактике ВМДАктуальные вопросы в лечении и профилактике ВМД

Современные аспекты и новые возможности ОКТСовременные аспекты и новые возможности ОКТ

Патология глазной поверхности и глаукома. Новые возможности и новые перспективы в решении «старых» проблемПатология глазной поверхности и глаукома. Новые возможности ...

Новейшие достижения в офтальмологииНовейшие достижения в офтальмологии

X Съезд офтальмологов России X Съезд офтальмологов России

Иммуномодулирующая и противовирусная терапия при лечении воспалительных заболеваний глаз различной этиологииИммуномодулирующая и противовирусная терапия при лечении вос...

«Нова Медика»: новые горизонты офтальмологии«Нова Медика»: новые горизонты офтальмологии

Рейтинг@Mail.ru