Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Экспериментальное обоснование противовоспалительной терапии


1----------

     Дексаметазон является базовым препаратом профилактики и лечения ПВР у детей в хирургии врожденных катаракт.

    В большинстве случаев назначение стандартной противовоспалительной схемы лечения обеспечивает благоприятное течение раннего послеоперационного периода. В случае развития ПВР, одним из методов ее купирования является увеличение дозы дексаметазона в применяемой терапии. Такая тактика обеспечивает различную степень купирования воспалительного процесса, и, в ряде случаев, может быть вовсе неэффективной.

    Из экспериментальных и клинических исследований известно, что дексаметазон угнетает пролиферацию лимфоцитов (в большей степени Т-лимфоцитов и NK-клеток), ослабляет взаимодействие Т- и В-лимфоцитов, снижает синтез провоспалительных цитокинов и антител [116, 128, 195, 196, 213]. Кроме того, показано снижение эффективности взаимодействия кластеров дифференцировки (CD) с диагностическим флуоресцирующим антителом при введении терапевтических доз кортикостероидов в реакцию фенотипирования лимфоцитов моноклональными антителами [67].

     В соответствии с поставленной задачей в данной работе изучен эффект воздействия глюкокортикостероидного препарата дексаметазон на экспрессию поверхностных рецепторов лимфоцитов и интенсивность энергетических процессов в них в экспериментах in vitro. Оценен эффект воздействия различных концентраций и времени экспозиции раствора дексаметазона (раствор для инъекций, KRKA 4 мг/мл) на количественный состав и уровень экспрессии поверхностных маркеров общей популяции лимфоцитов (CD45), популяций Т-лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD25, CD127, CD161), В-лимфоцитов (CD19), NK-клеток (CD16 и CD56) и их функциональную активность. Время экспозиции различных концентраций дексаметазона в цельной крови и выделенных клетках составляло 1 час, кроме того, был проведен анализ экспозиции концентрации препарата, соответствующей его терапевтической дозе, в выделенных клетках в течении 1-го и 3-х часов.

    В результате проведенных экспериментов выявлено, что эффект воздействия определяется дозой препарата. Выявлено достоверное снижение уровня экспрессии маркера CD45 и относительного количества общей популяции лимфоцитов (количество лимфоцитов снижалось в 2 раза) в цельной крови при применении максимальной концентрации дексаметазона (Табл. 36, рис. 17).

    Существующие данные о влиянии дексаметазона на количественный состав различных популяций лимфоцитов немногочисленны, а данные о влиянии препарата на активность СДГ отсутствуют вовсе. Известно о значительном снижении Т-хелперов и цитотоксических Т-клеток под воздействием дексаметазона, а также менее выраженном уменьшении регуляторных Т-клеток [128, 196, 213]. Исследование мокроты и периферической крови у пациентов со стероидрезистентной бронхиальной астмой выявило высокое содержание Th17-лимфоцитов [190, 197].

     При исследовании влияния дексаметазона на популяции Т-лимфоцитов периферической крови выявлено достоверное снижение уровня экспрессии маркеров Т-лимфоцитов (CD3), Т-хелперов (CD4), цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8), регуляторных Т-клеток (CD25, CD127low), активированных Т-хелперов (CD127high), а также достоверное увеличение относительного количества Т-лимфоцитов при увеличении концентрации препарата. Уровень экспрессии поверхностного маркера Th17-лимфоцитов (CD161) достоверно не изменялся (Табл. 37, рис. 18-20).

    Существует мнение, что глюкокортикостероиды влияют на В-лимфоциты опосредованно, за счет ингибирования индукции цитидиндезаминазы – основного регулятора генов, кодирующих синтез иммуноглобулинов [116].

    В данном исследовании достоверных изменений уровня экспрессии поверхностного В-клеточного маркера выявлено не было из-за большого разброса значений. Выявлено достоверное снижение относительного количества В-лимфоцитов (Табл. 38, рис. 21).

     Кроме того, известно о значительном снижении популяций NK-клеток под воздействием дексаметазона [128, 196]. Считается, что эффект дексаметазона на NK-клетки является проапоптотическим и антипролиферативным, что способствует снижению абсолютного количества клеток данной популяции при назначении глюкокортикостероидной терапии [195].

    В ходе эксперимента выявлено достоверное снижение уровня экспрессии поверхностных маркеров NK-клеток (CD16 и CD56) при воздействии дексаметазона, при этом достоверного снижения относительного количества NK-клеток не обнаружено (Табл. 39, рис. 22).

     Для оценки влияния дексаметазона на энергообмен в лимфоцитах проводили исследование взаимодействия различных концентраций дексаметазона (экспозиция 1 час) на клетки лимфоконцентрата и определяли активность СДГ в популяциях лимфоцитов (Табл. 40, рис. 23).

    Исследование влияния различных концентраций дексаметазона на энергетические процессы в популяциях Т-лимфоцитов выявило достоверное снижение активности СДГ в Т-лимфоцитах (CD3), цитотоксических Т-лимфоцитах (CD8) и активированных Т-хелперах (CD127high) при воздействии терапевтической концентрации препарата (4,0 мкг/мл); увеличение концентрации препарата не выявило достоверных изменений ферментативной активности. Оценка влияния различных концентраций дексаметазона на популяции Т-хелперов (CD4), Th17-лимфоцитов (CD161), регуляторных Т-клеток (CD127low) достоверных изменений активности СДГ не выявила. При воздействии различных концентраций препарата активность СДГ в популяциях В-лимфоцитов (CD19) и NK-клеток (CD16 и CD56) достоверно не изменялась.

     В ходе эксперимента было оценено влияние различной экспозиции (1 и 3 часа) концентрации дексаметазона, соответствующей его терапевтической дозе, на активность СДГ и уровень экспрессии поверхностных маркеров различных популяций лимфоцитов (Табл. 41).

    При оценке полученных данных выявлено достоверное снижение активности СДГ в общей популяции лимфоцитов (CD45), за счет снижения активности в популяциях Т-лимфоцитов (CD3), цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8), активированных Т-хелперов (CD127high) при экспозиции терапевтической концентрации дексаметазона (4,0 мкг/мл) в течении 1-го и 3-х часов, а также в популяциях Т-хелперов (CD4) и регуляторных Т-клеток (CD127low) при увеличении времени экспозиции до 3-х часов. Достоверных изменений активности СДГ в популяциях В-лимфоцитов (CD19), NK-клеток (CD16 и CD56) и Th17-лимфоцитов (CD161) при времени экспозиции 1 и 3 часа выявлено не было.

     Таким образом, при исследовании влияния различных концентраций дексаметазона на лимфоциты цельной крови выявлено достоверное снижение уровня экспрессии поверхностных маркерных рецепторов общей популяции лимфоцитов (CD45). Это снижение происходит за счет снижения уровня экспрессии в популяциях Т-лимфоцитов (CD3), Т-хелперов (CD4), цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8), регуляторных Т-клеток (CD127low), активированных Т-хелперов (CD127high), NK-клеток (CD16 и CD56). Кроме того, выявлено достоверное снижение относительного количества общей популяции лимфоцитов (CD45), В-лимфоцитов (CD19), а также увеличение относительного количества Т-лимфоцитов (CD3) и регуляторных Т-клеток (CD127low). При исследовании влияния дексаметазона на энергетические процессы в лимфоцитах периферической крови выявлено достоверное снижение активности СДГ в Т-лимфоцитах (CD3), Т-хелперах (CD4), цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8), активированных Т-хелперах (CD127high) и регуляторных Т-клетках (CD127low) в зависимости от времени экспозиции препарата. При исследовании влияния различных концентраций дексаметазона на популяцию NK-клеток (CD16 и CD56) выявлено дозозависимое снижение уровня экспрессии поверхностных маркеров, при этом активность СДГ оставалась на исходном уровне. В популяциях В-лимфоцитов (CD19) и Th17-лимфоцитов (CD161) достоверных изменений уровня экспрессии поверхностных рецепторов и активности СДГ выявлено не было.


Страница источника: 97

 ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества

Сателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Росс...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Эндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференцияЭндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенациональн...

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Рейтинг@Mail.ru