Партнеры


Монолит Optec R-optics Valeant thea Allergan Фокус santen tradomed sentiss sentiss



Издания


Российская офтальмология онлайн Российская
Офтальмология Онлайн

№ 29 2018
№ 28 2017
№ 27 2017
№ 26 2017
№ 25 2017
...
Журнал Офтальмохирургия Журнал
Офтальмохирургия

№ 1 2018 г.
№ 4 2017 г.
№ 3 2017 г.
№ 2 2017 г.
...
Журнал Новое в офтальмологии Новое в
офтальмологии

№ 1 2018 г.
№ 4 2017 г.
№ 3 2017 г.
№ 2 2017 г.
...
Российская детская офтальмология Российская
детская офтальмология

№ 1 2018
№ 4 2017
№ 3 2017
№ 2 2017
...
Современные технологии в офтальмологии Современные технологии
в офтальмологии

№ 1 2018
№ 7 2017
№ 6 2017
№ 5 2017
...
Восток – Запад Восток - Запад.
Точка зрения

Выпуск 4. 2018
Выпуск 3. 2018
Выпуск 2. 2018
Выпуск 1. 2018
...
Новости глаукомы Новости
глаукомы

№1 (45) 2018
№1 (41) 2017
№1 (37) 2016
№1 (33) 2015

....
Мир офтальмологии Мир офтальмологии
№1 (38) Март 2018
№5 (37) Декабрь 2017
№4 (36) Октябрь 2017
№3 (35) Август 2017
№2 (34) Май 2017
№1 (33) Март 2017
....


facebooklogo     youtubelogo



Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Влияния экстракта амниотической мембраны на развитие неоваскуляризации роговицы после щелочных ожогов


1Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова

    Введение

     Длительное время ведется поиск новых средств для лечения заболеваний роговицы. При ожогах роговицы и кератитах с 40-х годов в качестве биогенного стимулятора применялась амниотическая мембрана (АМ) [18, 25]. На настоящий момент установлено, что применение АМ стимулирует регенерацию клеток роговичного эпителия за счет содержания эпидермального фактора роста (EGF) [12, 14], оказывает антибактериальный эффект, угнетает фиброз и ангиогенез [5, 17, 23]. Кроме того, АМ обладает низкой иммуногенностью, так как содержит неполные HLA-A, B, C и DR антигены и поэтому реакции отторжения АМ наблюдаются крайне редко [3, 9], а также является субстратом для выращивания стволовых и эпителиальных клеток за счет наличия базальной мембраны [10, 24]. Однако применение АМ связано с необходимостью хирургического вмешательства, что исключает возможность быстрого применение данного метода лечения после получения повреждения или химического ожога роговицы [1, 11]. Кроме того, хранение АМ требует создания и поддержания определенных условий [19]. Одна из гипотез, объясняющая механизмы терапевтического эффекта трансплантации консервированной АМ, которая представляет собой инертную ткань, не содержащую живых клеток, гласит, что влияние консервированной АМ на процессы репарации, главным образом обусловлено изменением локальной среды за счет факторов роста и цитокинов, которые локализуются в эпителиальных клетках [8, 21]. В связи с этим уделяется особое внимание сохранению морфологии эпителия при консервации АМ [20, 24]. В настоящее время разработано несколько методик получения экстракта амниотической мембраны (ЭАМ) [2, 6, 7, 16, 22]. Однако, данных об использовании ЭАМ и в литературе недостаточно.

    Цель

    Оценить влияние инстилляций жидкого ЭАМ на развитие неоваскуляризации роговицы после тяжелых щелочных ожогов роговицы и лимба и вероятность развития перфорации в отдаленные сроки после ожога роговицы в эксперименте на кроликах.

    Материал и методы

    Образец амниона был получен через 4 часа после родов, выделен из тканей плодных оболочек в стерильных условиях и трижды отмыт стерильным раствором Хэнкса. Фрагмент амниотической мембраны массой 5.0 г был измельчен до фрагментов 4-5 мм. Масса амниотической мембраны была смешана с кварцевым песком размером частиц 0.1 и измельчена ручным способом. Амнион был суспендирован в физиологическом растворе (20 мл) и центрифугирован на 2000 об/мин в течение 10 минут. Надосадочная жидкость, не содержащая различимых частиц амниотической мембраны, была собрана и отфильтрована через бактериальный фильтр с диаметром пор 0,22 мкм. Аликвоты экстракта аминотической мембраны были разлиты в одноразовые флаконы-капельницы в стерильных условиях и хранились до использования при t=-20C°.

    Экспериментальное исследование проводили на 6 половозрелых кроликах (12 глаз) породы шиншилла, весом 2,5-3,0 кг. У животных были смоделированы щелочные ожоги роговицы (50% площади) и лимба (180°). Ожоги выполнялись под местной анестезией аппликацией 1M раствора NaOH в течение 1 минуты, с последующей тщательной нейтрализацией остатков щелочи достаточным количеством физиологического раствора. После нанесения ожога все животные получали инстилляции гентамицина 4 раза в сутки в оба глаза и экстракта амниотической мембраны в неконтрольный (левый) глаз в течение 20 суток. В ходе наблюдения у животных регулярно оценивали площадь неоваскуляризации роговицы. Заключение о влиянии исследуемого препарата на вероятность развития перфорации роговицы и окончательную оценку интенсивности неоваскуляризации делали через 30 суток.

    Результаты

    На 4 сутки после ожога площадь неоваскуляризации на контрольных и неконтрольных глазах составила 5,5±1,2% и 7,5±1,7%, соответственно (p=0.23). Статистически значимое увеличение площади неоваскуляризации при применении экстракта амниотической мембраны по сравнению с контролем было зафиксировано на 7 сутки 12,1±3,2% и 28,5±12,7%, соответственно (p=0.01) и сохранялось на протяжении всего периода наблюдения, составив к исходу 30 суток 43,3±4,7% и 81,9±19,7%, соответственно (p=0.02) (рис.). Соотношение наличия или отсутствия перфорации роговицы среди контрольных и неконтрольных глаз составило 2/4 и 4/2, соответственно (p=0.15).

    Обсуждение

    Достоверно установлено присутсвие в АМ эпидермального фактора роста (EFG), фактора роста фибробластов (bFGF) и фактора роста кератиноцитов (KGF), трансформирующего фактора роста (TGF) альфа и бета, фактора роста гепатоцитов (HGF) и фактора роста нервов (NGF) [15]. Действие данных факторов направлено на стимуляцию эпителизации. С помощью метода иммуносорбентного анализа в составе АМ был обнаружен фактор роста сосудов (AGF) и васкулоэндотелиальный фактор роста (VEGF) [3, 14]. Данные факторы оказывают сильное влияние на проницаемость сосудов, являются мощными ангиогенными белками. Кроме того, в АМ входят тканевые ингибиторы металлопротеиназ (TIMP), действие которых прямо противоположно. Они обладают деградирующей способностью в отношении почти всех компонентов внеклеточного матрикса и подавляют неоваскуляризацию [4].

    В ходе нашего экспериментального исследования было установлено, что экстракт амниотической мембраны не вызывает увеличения риска развития перфорации роговицы в отдаленные сроки после ожога. Нами не было установлено увеличения числа перфораций, что позволяет сделать вывод, что в рассмотренной нами экспериментальной модели преобладают эффекты выделенных из АМ ростовых факторов, а не тканевых ингибиторов металлопротеиназ. Мы не исключаем, что при рассмотрении другой модели возможно получение иного результата.

    Результаты проведенного экспериментального исследования демонстрируют стимулирующее влияние ЭАМ на неоваскуляризацию роговицы после тяжелых щелочных ожогов роговицы и лимба. Применение же АМ в классическом виде угнетает ангиогенез [18]. Данный факт может означать, что полученный нами ЭАМ включает преимущественно факторы, стимулирующие неоваскуляризацию (AGF и VEGF), и содержит меньшее количество тканевых ингибиторов металлопротеиназ, либо биологическая эффективность тканевых ингибиторов металлопротеиназ в рамках нашего исследования меньше эффективности ростовых факторов.

    Развитие неоваскуляризации является защитным механизмом, направленным на ускорение репаративных процессов в поврежденной области. Стимуляция неоваскуляризации при применении ЭАМ в рамках нашего исследования может объяснить отсутствие увеличения числа перфораций в опытной группе, а при других условиях или при увеличении числа наблюдений может показать положительные эффекты в отношении предотвращения развития перфораций. Это может найти применение в клинической практике, например при тяжелых ожогах или глубоких язвах.

    Заключение

    Экстракт амниотической мембраны стимулирует неоваскуляризацию роговицы после тяжелых щелочных ожогов роговицы и лимба и не вызывает увеличения риска развития перфорации роговицы в отдаленные сроки после ожога.


Страница источника: 147

Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Между...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизонты -  2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизон...

Сателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКОСателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКО

VIII Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО)VIII Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО)

XVII Всероссийская школа офтальмологаXVII Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018 ХVI Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица II. Топография роговицы. Аберрации глаза 2018 Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица II. Топография роговицы. Аберрации глаза 2018 Научн...

 ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества

Сателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Росс...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Эндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференцияЭндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенациональн...

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Рейтинг@Mail.ru


Open Archives