Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст
УДК:617.735-002-085

Патогенетическое обоснование применения кверцетина (липофлавона) у больных с диабетической ретинопатией


1Медицинская академия имени С. И. Георгиевского Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского»
2Клиническое территориальное медицинское объединение «Университетская клиника» Клиническая больница им. Н.А. Семашко

     К основным патогенетическим механизмам развития ретинопатии (стимуляция формирования микроаневризм и ремоделирования капиллярной сети с последующей ишемией) относится цитокиновый дисбаланс, включающий возрастание уровня эндотелина (Et) даже у пациентов с коротким стажем течения сахарного диабета (СД) [2, 3, 12, 13]. Один из цитокинов – интерлейкин 1β (IL-1β) играет ключевую роль в иммуногенезе и участвует в процессах взаимодействия иммунной, эндокринной и нервной систем [1, 6]. Он также стимулирует функциональную активность фибробластов, синтез фибронектина, коллагена, а также адгезию нейтрофилов и эозинофилов к сосудистому эндотелию, может выступать в качестве индуктора деградации коллагена роговичными фибробластами в культуре клеток [14]. IL-1β активирует хемокины IL-8, GROα и MIP-1α, которые посредством активации нейтрофилов и увеличения миграции эозинофилов способствуют хронизации воспаления в тканях глаза [13]. В научной литературе имеется небольшое количество публикаций, свидетельствующих о влиянии препаратов группы флавоноидов (кверцетина) на биологические эффекты цитокинов [16].

    Флавоноиды (кверцетин) относятся к нетоксичным полифенольным соединениям – способным обрывать цепные свободнорадикальные реакции, изменять активность различных ферментов, прямо и опосредованно (через антиоксидантный эффект) модулировать цитокиновый потенциал и др. [8, 20].

    Кверцетин обладает свойствами ингибитора ряда оксидазных ферментов, мощного антиоксиданта, препарата, способствующего нейтрализации окиси азота в ишемизированных тканях и соответственно выраженным мембрано-стабилизирующим действием [8].

    В ряде исследований выявлена способность кверцетина действовать в качестве ингибитора IL-1стимулированной секреции активированными клетками IL-6 и ряда биологически активных веществ [15]. Logvinov S.V. с соавт. [11] доказано позитивное влияние кверцетина на кровоснабжение сетчатки.

    Обнаружено ингибирующее влияние кверцетина на активность редуктазы в эпителии роговицы, радужной оболочке глаза и хрусталике. В последние годы установлено, что флавоноиды защищают клетки ганглии и эпителиальные клетки сетчатки от негативного влияния активных форм кислорода [16].

    Доказано, что действие кверцетина связано не только за счет антиоксидантного эффекта, но и за счет резкого торможения деградации мембранных фосфолипидов и уменьшения накопления свободных жирных кислот. При этом кверцетин способен обрывать свободнорадикальные реакции непосредственно в сосудистой стенке [8]. Perez-Vizcaino F. с соавт. [21] установлено, что кверцетин оказывает сосудорасширяющее действие и уменьшает ремоделирование сосудистой стенки, а также оказывает дифференцированное влияние на апоптоз гладкомышечных клеток артерий. По данным Donnini S. с соавт. [10] кверцетин способен модулировать регенерацию клеток сосудистого эндотелия.

    В небольшом ряду водорастворимых форм кверцетина особое место занимает липофлавон – кверцетин, включенный в уникальную систему доставки – липосому [9]. Указанная лекарственная форма позволяет добиться активной пенетрации кверцетина в патологический очаг благодаря высокой биодоступности липосомальной формы доставки, синергизма эффектов кверцетина и липосомальной формы фосфатидилхолина, что сопровождается достоверным усилением антиоксидантного, цитопротекторного и эндотелийпротекторного эффекта [5].

    ЦЕЛЬ

    Определить влияние кверцетина (липофлавона) на дисбаланс цитокинового гомеостаза у больных с различными формами диабетической ретинопатии.

    МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

    Материалом исследования служила сыворотка крови пациентов с СД, исследования проводились in vitro. Обследовано 119 пациентов с диабетической ретинопатией (ДР): 1-я группа – 14 пациентов с непролиферативной ретинопатией (НДР), 2-я группа – 39 пациентов с препролиферативной ретинопатией (ППДР), 3-ю группу составили 42 пациента с пролиферативной ретинопатией (ПДР). Контролем служили 24 здоровых донора в соответствующем возрастном диапазоне. Концентрацию цитокинов IL-1β и IL-4 в сыворотке крови и культуральной среде культуры клеток определяли иммуноферментным методом с использованием коммерческих наборов (ООО «Цитокины» IL-1β , протеиновый контур – TNF-α, IL-4).

    Оценка результатов осуществляется фотометрически.

    Проводились также эксперименты с определением уровня TNF-α в культуральной среде без и с преинкубацией культивируемых клеток с раствором глюкозы, инсулина, липополисахарида (LPS) [17, 22].

    РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

     Липофлавон-зависимая динамика уровня цитокинов в культуральной жидкости культуры мононуклеарных клеток пациентов 1-й, 2-й и 3-й групп представлена в табл.1. В культуральной среде культуры мононуклеарных клеток у пациентов 1-й группы уровень цитокина IL-1β был значительно ниже, чем в системном кровотоке у здоровых лиц (контроль) и составил 13,01±0,36 пг/мл. В эксперименте 2 (IL-1β) под влиянием введения в культуральную среду 5,5 ммоль/л глюкозы исследованный показатель возрастал на 33,8% (р<0,001), а в культуральной экспериментальной модели с липофлавоном (эксперимент 3(IL1β)) – статистически значимо снижался на 14,4% (р<0,01).

    У пациентов 2-й и 3-й групп исходный (в эксперименте 1 (IL-1β)) уровень IL-1β соответственно на 95,7% (р2<0,001) и 148,0% (р2<0,001) был выше, чем у пациентов 1-й группы и статистически значимо не менялся под влиянием введения в культуральную среду глюкозы. Можно предположить, что у пациентов СД с более длительным стажем течения заболевания и с более высокими цифрами гипергликемии имеет место полная реализация in vivo глюкозо-индуцированной функциональной активности мононуклеаров, что и проявляется отсутствием глюкозо-индуцированного синтеза IL-1β в витральном культуральном эксперименте. Вместе с тем у пациентов 2-й и 3-й группы сохраняется липофлавон-зависимое снижение синтеза IL-1β в культуре клеток: в эксперименте 3 (IL-1β)) уровень IL-1β снижается соответственно на 17,3% (р<0,01) и 8,6% (р<0,05).

    Влияние липофлавона на глюкозо-индуцированный уровень IL-4 в культуральной среде культуры мононуклеарных клеток у исследуемых пациентов (in vitro) представлено в табл. 2. В культуральной среде культуры мононуклеарных клеток как у пациентов 2-й, так и у пациентов 3-й группы исходный (в эксперименте 1(IL-4)) уровень цитокина IL-4 в 1,6 раза (р2<0,001) был выше, чем у пациентов 1-й группы, и статистически значимо не менялся в экспериментальных культуральных моделях с глюкозой и липофлавоном. У пациентов 1-й группы динамики исследованного показателя под влиянием глюкозы также не обнаружено, но в эксперименте 3(IL-4) под влиянием липофлавона исследованный показатель на 8,8% (р1<0,02) был ниже в сравнении с экспериментом 2(IL-4) у пациентов той же группы.

    Таким образом, у пациентов с непролиферативной ретинопатией модулирующее влияние липофлавона на глюкозо-индуцированный синтез мононуклеарными лейкоцитами IL-4 сохраняется.

    Влияние липофлавона на глюкозо-индуцированный уровень – tumor nеcrosis factor (TNF-α) – в культуральной среде культуры мононуклеарных клеток у исследуемых больных (in vitro) представлено в табл. 3.

    Нами установлено, что в культуральной среде культуры мононуклеарных клеток у пациентов 2-й и 3-й групп исходный (в эксперименте 1 (TNF-α)) уровень цитокина TNF-α на 19,1-39,3% (р2<0,001) выше, чем у пациентов 1-й группы. В экспериментальных культуральных моделях с глюкозой динамика исследованного показателя выявлена была только у пациентов 1-й и 2-й групп: уровень TNF-α в культуральной среде возрастал соответственно на 11,4% (р<0,05) и 14,3% (р<0,01). В эксперименте 3(TNF-α) под влиянием введения в культуральную среду липофлавона уровень TNF-α у пациентов 1-й группы снижался в сравнении с экспериментом 2(TNF-α) на 19,0% (р1<0,001), у пациентов 2-й и 3-й групп – соответственно на 22,7% (р<0,02, р1<0,001) и 21,8% (р<0,01, р1<0,001).

    Таким образом, нами установлено, что под влиянием гипергликемии у пациентов СД с диабетической ретинопатией может возрастать лейкоцито (лимфоцито)-зависимый уровень провоспалительных цитокинов местно (in loko morbi, куда лейкоциты активно мигрируют из общего кровотока), на уровне тканей глаза. Подтверждением этой мысли служит то, что в отличие от эритроцитов и тромбоцитов лейкоциты в русле крови не выполняют никаких функций, кровоток служит лишь для их транспорта; функционируют лейкоциты в органах и тканях, куда они мигрируют. В кровотоке же находится не более 1-2% всех лейкоцитов организма [4].

    С другой стороны, представленные результаты исследований, по нашему мнению, могут расцениваться как патофизиологическое обоснование использования липофлавона для коррекции дисбаланса цитокинового гомеостаза у пациентов с диабетической ретинопатией, прежде всего – препролиферативной и пролиферативной стадии.

    По данным некоторых авторов инсулиновые рецепторы идентифицированы на эритроцитах, фибробластах, нейтрофилах, моноцитах, В-лимфоцитах, а также на активированных Т-лимфоцитах, перитонеальных макрофагах и ряде других клеток [18, 19]. Под влиянием главного лекарственного средства – инсулина – у пациентов СД возрастает синтез эндотелиальными клетками (также имеющими рецепторы к инсулину) ET-1, возрастает синтез vWf, подавляется фибринолитическая активность клеток эндотелия, что приводит к повреждению эндотелия несбалансированно высоким образованием фибрина и тромбина, а также к формированию условий для агрегации тромбоцитов [7].

    В культуре клеток адипоцитов некоторыми авторами в условиях экспериментальной модели острого воспаления установлено, что синтезируемые клетками цитокины снижают активацию на клетках инсулиновых рецепторов и уменьшают стимулированное инсулином поглощение клетками глюкозы. По мнению авторов, указанный «цитокин-зависимый» механизм может лежать в основе формирования инсулинорезистентности у пациентов СД [19].

    Указанные факты, по нашему мнению, являются весомой научной аргументацией для проведения научных исследований по проблеме инсулин-зависимой функциональной (включая цитокин-продуцирующей) активности мононуклеарных лейкоцитов, а также возможности использования липофлавона для коррекции выявленных инсулин-опосредованных нарушений.

     Результаты исследования липофлавон-зависимой динамики уровня цитокинов в культуральной жидкости культуры мононуклеарных клеток пациентов 1-й, 2-й и 3-й групп представлены в табл. 4. и 5.

    В культуральной среде культуры мононуклеарных клеток у пациентов 1-й группы уровень цитокина IL-1β в инкубационных экспериментальных моделях с инсулином и липофлавоном существенно не меняется. У пациентов 2-й и 3-й групп уровень IL-1β под влиянием инсулина статистически значимо возрастает на 13,7–15,4% (р<0,01). Можно предположить, что у пациентов СД с более длительным стажем течения заболевания формируется инсулинзависимый механизм формирования цитокинового (IL-1β) дисбаланса.

    Также установлено, что только у пациентов с препролиферативной и пролиферативной ретинопатией в эксперименте с липофлавоном выявлена не только отмена инсулинзависимого повышения синтеза мононуклеарами IL-1β (на 22,0–27,0%, р1<0,001), но и достоверное снижение независимого от инсулина синтеза цитокина мононуклеарными лейкоцитами (р<0,001).

    В культуральной среде культуры мононуклеарных клеток динамики уровня цитокина IL-4 под влиянием инсулина, а также липофлавона нами не обнаружено (табл. 5).

    Влияние липофлавона на инсулинзависимый уровень tumor nеcrosis factor (TNF-α) в культуральной среде культуры мононуклеарных клеток у исследуемых пациентов (in vitro) представлено в табл. 6. В экспериментальных культуральных моделях с инсулином динамики исследованного показателя у пациентов 1-й, 2-й и 3-й групп не выявлено. В эксперименте 3 (TNF-α) под влиянием введения в культуральную среду липофлавона уровень TNF-α у пациентов 1-й группы снижается в сравнении с экспериментом 2 (TNF-α) на 10,2% (р1<0,05), у пациентов 2-й и 3-й групп – соответственно на 12,1% (р1<0,05) и 14,5% (р1<0,01). Указанные факты позволяют утверждать, что инсулинзависимого возрастания синтеза TNF-α мононуклеарными лейкоцитами пациентов с ДР не выявлено.

    Таким образом, нами установлено, что под влиянием инсулина у пациентов СД с диабетической ретинопатией препролиферативной и пролиферативной стадии может возрастать лейкоцито (лимфоцито)-зависимый уровень провоспалительного цитокина IL-1β, что, по нашему мнению, может расцениваться как подтверждение научной обоснованности использования липофлавона для коррекции не только глюкозо-опосредованного, но и инсулинзависимого дисбаланса цитокинового гомеостаза у пациентов с диабетической ретинопатией, прежде всего – препролиферативной и пролиферативной стадий.

    ВЫВОДЫ

    У пациентов с диабетической ретинопатией выявленное нарастание синтеза мононуклеарными лейкоцитами провоспалительных цитокинов IL-1β и TNF-α по мере нарастания степени тяжести ангиопатии может быть расценено как важная патогенетическая «составляющая» прогрессирования ангиопатии.

    Установлено, что при диабетической ретинопатии существует статистически достоверное влияние кверцетина (липофлавона) на функциональную активность мононуклеарных клеток: при культивировании клеток в присутствии кверцетина (липофлавона) уровень цитокинов IL-1β и TNF-α в культуральной среде снижается, что позволяет рекомендовать его для лечения ДР.

    Существенным механизмом прогрессирования диабетической ретинопатии является гипергликемия– и инсулинзависимый лейкоцито(лимфоцито)-опосредованный механизм формирования цитокинового дисбаланса.

    

    Сведения об авторах

    Иванова Нанули Викторовна – доктор медицинских наук, профессор, зав. кафедрой офтальмологии ГУ «Крымский государственный медицинский университет им. С.И. Георгиевского»

    Ярошева Наталья Анатольевна – к.м.н., доцент кафедры офтальмологии ГУ «Крымский государственный медицинский университет им. С.И. Георгиевского». Чистякова Светлана Владимировна – к.м.н., доцент кафедры офтальмологии ГУ «Крымский государственный медицинский университет им. С.И. Георгиевского».

    Ярошева Любовь Михайловна – главный специалист МЗ Крыма по специальности «Офтальмология». Микрохирургический офтальмологический центр ГБУЗ РК «КБ им. Н. А. Семашко».


Страница источника: 51

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru