Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Экспериментальный этап исследования


1----------

     С целью оптимизации технологии УФ-кросслинкинга со скарификацией эпителия роговицы, нами был разработан новый инструмент, который благодаря особенностям своей конструкции, позволяет одним нажатием на его кнопку выполнять равномерную дозированную скарификацию эпителия роговицы, не повреждая Боуменову мембрану и передние слои стромы (Рис. 1). Длину шипов (60 мкм.) рассчитали после выполнения исследования 30-ти глаз 19-ти пациентов, в результате которого после трехкратной инстилляции 0,5% раствора проксиметакаина толщина эпителия составила в среднем 55,3±4,7 мкм. Центрирование инструмента на роговице пациента во время операции осуществляли устанавливая его внутрь посадочного фланца градуированного вакуумного кольца, предварительно наложенного концентрично лимбу на поверхность глазного яблока.

    Задачами экспериментальной части последовательно явились определение эффективности этапов доставки рибофлавина в строму роговицы при различных технологиях УФ-кросслинкинга, морфологическое исследование глубины и характера повреждения эпителия роговицы при использовании инструмента - скарификатора, а также сравнение скорости восстановления эпителия при моделировании начальных этапов различных технологий УФ-кросслинкинга.

    С целью определения глубины и характера воздействия на роговицу разработанного инструмента для дозированной скарификации эпителия роговицы, нами выполнено морфологическое исследование на 3-х кадаверных глазах не пригодных для целей трансплантации. В результате выявили, что при применении нового скарификатора происходит альтерация всех слоев эпителия роговицы вплоть до Боуменовой мембраны без нарушения целостности последней (Рис. 2).

    В связи с тем, что длительное восстановление целостности эпителия после оперативного вмешательства увеличивает риск послеоперационных инфекционных осложнений и вызывает у пациента выраженный дискомфорт, задачей эксперимента in vivo на кроликах явилось сравнение скорости восстановления эпителия при моделировании начальных этапов различных технологий УФ-кросслинкинга. В ходе данного эксперимента нами определена значительно большая скорость восстановления целостности эпителия после дозированной скарификации эпителия роговицы (на 2-й день наблюдения) по сравнению с полной деэпителизацией (на 5-й день наблюдения). Данное наблюдение нашло свое последующее подтверждение в ходе клинике, что выражалось в значительно меньшей степени и продолжительности роговичного синдрома у пациентов, которым выполняли УФ-кросслинкинг с дозированной скарификацией эпителия роговицы.

    Для точного определения возможности проникновения рибофлавина в строму роговицы в ходе выполнения различных технологий УФ–кросслинкинга нами впервые в мировой практике применена инфракрасная Фурье-спектроскопия, позволяющая достоверно обнаруживать химические вещества в биологических жидкостях и тканях. Исследование проводили на ИК - микроскопе Hyperion 2000 с кристаллом германия (Ge), совмещенным с вакуумным ИК - Фурье спектрометром модели IFS 66v/s (Bruker). Эксперимент выполнили на базе Института нефтехимического синтеза им. А. В. Топчиева РАН и Центра фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем МНТК «Микрохирургия глаза».

     Исследование проводили на 9 донорских глазах человека (3 группы по 3 глаза) не пригодных для целей трансплантации. В первой группе моделировали этап доставки рибофлавина в строму роговицы по классической технологии УФ-кросслинкинга с полным удалением эпителия, во второй – по трансэпителиальной технологии, в третьей – по технологии с дозированным механическим нарушением целостности эпителия при помощи разработанного инструмента. Во второй группе для разрыхления контактов между клетками эпителия роговицы, в течении 30-ти минут (по 1 капле в минуту) инстиллировали 0,5% раствор проксиметакаина, содержащий в качестве консерванта бензаклония хлорид. Перед проведением Фурье-спектроскопии, на исследуемые роговицы инстиллировали 0,1% раствор риблофлавина на протяжении 30 минут (по 1 капле в минуту). Для определения полноценного пропитывания стромы роговицы рибофлавином, регистрацию ИК-спектров в режиме нарушенного полного внутреннего отражения (НПВО) проводили со стороны эндотелия и оценивали изменение полос спектра, характерных для рибофлавина. При исследовании порошковой формы рибофлавина на ИК-микроскопе, было выявлено, что самой интенсивной в его спектре является полоса 1542 см-1. Количественной характеристикой изменения ИК-спектров служило изменение относительной интенсивности полос 1542 см-1 и 1640 см-1, выраженное в процентах. Полоса 1640 см-1 была выбрана в качестве контроля в виду того, что она относится к той же пептидной связи что и полоса 1542 см-1 и отражает в ней исключительно различный тип колебаний. Следовательно, в одинаковых условиях относительная интенсивность обеих полос остается постоянной. Регистрацию ИК-спектров отражения проводили многократно с разных участков эндотелиальной стороны роговицы для выявления возможных флуктуаций. Контролем служил ИК-спектр роговиц, зарегистрированный до нанесения на них рибофлавина.

    При анализе усредненного инфракрасного спектра отражения роговиц первой группы выявили достоверное увеличение относительной интенсивности полосы 1542 см-1 по сравнению с контролем на 7,3±0,5% (таблица 1), что свидетельствовало о проникновении рибофлавина через все слои стромы роговицы после полной ее деэпителизации. Анализ усредненного спектра роговиц третьей группы показал сходные результаты, относительная интенсивность его полосы 1542 см-1 была выше на 7,8±0,6% по сравнению с контролем (таблица 1), что доказывает пропитывание всей толщи роговицы после выполнения скарификации эпителия. Относительная интенсивность полосы 1542 см-1 усредненного ИК-спектра роговиц в условиях интактного эпителия (2 группа) не имела статистически значимой разницы по сравнению с контролем (таблица 1). Данный факт указал на отсутствие проникновения рибофлавина через эпителий роговицы после инстилляции на него раствора бензалкония хлорида и обосновывает нецелесообразность использования трансэпителиальной технологии УФ-кросслинкинга в клинической практике.


Страница источника: 9

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru