Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Исследование ультраструктуры роговичной стромы после фемтокросслинкинга в эксперименте


1Чебоксарский филиал «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова Росмедтехнологии»
2Научно-производственная компания Витаформ
3Глазной центр «Восток-Прозрение»

     Кросслинкинг роговичного коллагена (КРК), основанный на совместном использовании фотосенсибилизатора рибофлавина и УФ —света длиной волны 370 нм, был предложен в 2003 г. доктором Волензаком с соавт. [11 —15].

    Несмотря на то, что КРК зарекомендовал себя в клинической практике, по —прежнему предпринимаются усилия для изменения стандартного протокола, чтобы повысить безопасность и комфорт пациентов [6]. Широко распространенный Цюрихский протокол для КРК включает удаление эпителия роговицы для облегчения проникновения рибофлавина в строму [13]. Однако деэпителизация сопровождается болью, ощущением инородного тела, дискомфортом в виде жжения и слезотечения в течение нескольких дней. Кроме того, при удалении эпителия уменьшается общая толщина роговицы, а последующее проведение КРК на тонкой роговице может быть причиной рубцов роговой оболочки, повреждения эндотелия и даже перфорации [4, 8, 9]. Поэтому исследователи и клиницисты в настоящее время заинтересованы в разработке варианта КРК без деэпителизации при сохранении эффективности стандартного подхода. Известна методика трансэпителиального кросслинкинга, при которой перед закапыванием рибофлавина для разрыхления эпителия роговицы инстиллируют сначала раствор тетракаина в течение 30 минут [3, 5, 10]. Однако при применении данной методики достигается только одна пятая часть биомеханического эффекта [16].

    В связи с этим рядом авторов была предложена методика роговичного кросслинкинга без удаления эпителия с фемтосекундным формированием интрастромального кармана для введения 0,1% раствора рибофлавина с последующим ультрафиолетовым облучением, которая выглядит актуальной [1, 2, 7].

    Цель – изучение структуры тканей роговицы после фемтокросслинкинга в эксперименте.

    Материал и методы

    В работе использовали самцов кроликов породы Шиншилла массой 2 —3 кг. Исследования выполняли на 12 глазах 6 кроликов. Животные были разделены на 2 разные группы по 3 кролика в каждой:

    1. Опытная группа – кролики, которым проводилась процедура кросслинкинга с применением фемтолазера [14].

    2. Контрольная группа – кролики, которым проводилось только фемтолазерное формирование кармана без процедуры кросслинкинга.

    Срок наблюдения составил 1 неделю, 1 и 3 мес.

     Процедура проводилась кроликам под общей (в/м 5% раствор кетамина) и местной (инстилляция 0,3% раствора инокаина) анестезией. Животным 1 группы под местной анестезией выполняли процедуру фемтокросслинкинга с помощью фемтосекундного лазера IntraLaseFS 60 кГц (Advanced Medical Optics). Для этого на заданной глубине (100 —110 мкм) формировали карман диаметром 9,0 мм, уголом вреза 45 градусов, уголом петли 45 градусов. В сформированный таким образом карман с помощью тупоконечной канюли вводили 0,1% раствор рибофлавина до полного и равномерного пропитывания стромы. Затем проводили облучение ультрафиолетовым светом при стандартных параметрах в течение 30 минут с помощью аппарата EVOLUTION (ООО «Трансконтакт», Россия).

    Во 2 —й группе животным проводили только процедуру формирования роговичного кармана на заданной глубине (100 —110 мкм) и диаметром 9,0 мм с уголом вреза 45 градусов, уголом петли 45 градусов с помощью фемтосекундного лазера – IntraLasе FS 60.

    На сроках 1 неделя, 1 и 3 мес. кроликов выводили из эксперимента воздушной эмболией, глаза энуклеировали, роговицы вырезали с помощью трепана 9,0 мм. Выкроенные роговицы фиксировали в растворе глютаральдегида на фосфатном буфере в течение 24 часов, далее фиксировали осмием и готовили препараты для электронной микроскопии. Гистоморфологические исследования делали на трансмиссионном электронном микроскопе JЕOL 1200 EX (Япония) на базе Института биотехнологии РАН (Москва).

    Результаты и обсуждение

    Результаты проведенных электронно —микроскопических исследований показали, что через неделю после операции у животных 1 группы сразу под эпителием идет формирование продольных и поперечных сшивок коллагена, которые сконцентрированы вблизи базальной мембраны эпителия (рис. 1).

    К 1 мес. после процедуры кросслинкинга с применением фемтолазера сшивки коллагена в основном представлены в поверхностных слоях стромы (рис. 2).

    На сроке 3 мес. после процедуры сформированные сшивки сохраняются, вероятно, без влияния на них процессов ремоделирования (рис. 3).

    При большем увеличении в поверхностных слоях стромы определялись пласты сшитых волокон и пучков коллагена (рис. 4). Часть волокон сшито бок в бок, другая часть – конец в конец. На всех сроках наблюдения на препаратах 1 группы не обнаруживали явлений воспаления либо других осложнений.

     В роговицах кроликов контрольной группы заживление эпителия и роговичной стромы на всех сроках после фемтолазерного формирования кармана, без последующей процедуры кросслинкинга, проходило без каких —либо особенностей. А именно через 1 неделю в зоне фемтолазерного формирования кармана определялись некротические отложения в строме между коллагеновыми фибриллами, вызванные деструктивными изменениями после воздействия фемтосекундного лазера. Изменения эпителия и субэпителиального слоя над стромальным карманом не визуализировались. Через 1 мес. после фемтолазерного формирования кармана эпителий и субэпителиальный слой, а также ход волокон в зоне формирования кармана не были изменены, определялись единичные кератобласты (рис. 5).

    Заключение

    1. Фемтолазерное формирование кармана в роговичной строме для интрастромального введения рибофлавина является безопасной процедурой.

    2. Наличие сформировавшихся сшивок волокон коллагена роговичного коллагена под воздействием фемтокросслинкинга, сохраняющихся до 3 —х мес. без изменений, говорит об эффективности новой методики.


Страница источника: 137

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru