Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

3.3.Разработка технологии криогенной консервации аллогенных фрагментов лимба с иммуносупрессивными свойствами


1----------

     В целях возможности создания Банка криоконсервированных аллогенных фрагментов лимба лимбальные образцы, прошедшие стадию первичной органотипической консервации в течение 28 суток, были равноценно разделены на 2 группы исследования.


    Результаты исследования после криогенной консервации в течение 1 месяца показали, что ультраструктура лимбальных фрагментов во II-й группе без добавления в среду криопротектора характеризовалась расширением пространств между коллагеновыми волокнами, появлением зон деструктурированного коллагена, а также набуханием и разрушением клеток АФЛ (рис. 12 В, Г).


    Таким образом, результаты демонстрируют необходимость добавления криопротекторов при криогенной консервации для длительного хранения жизнеспособных клеток и ультраструктурной сохранности лимбального трансплантата.


    Полученные данные явились основанием для продолжения изучения функциональных возможностей клеток АФЛ, криоконсервированных в I-й группе и прекращения дальнейших исследований АФЛ из II-й группы.


    Исследования по изучению длительности хранения аллогенных фрагментов лимба при низких температурах (-80°С и -196°С) проводились в течение 2-х лет с момента замораживания.


     Фрагменты лимба, консервированные при -80°С, размораживались поочередно через 1, 3, 6 и 9 месяцев, при -196°С – через 6, 12, 18 и 24 месяца и подвергались последующей вторичной органотипической консервации в условиях нормотермии (при t 37°C в атмосфере с 5% СО2 и 95% влажности) в течение 21суток с использованием стандартной культуральной среды, состав которой изложен в разделе 2.1.2.


    Результаты световой фазово-контрастной микроскопии демонстрируют постепенное восстановление пролиферации клеток после размораживания лимбальных фрагментов, ранее криоконсервированных при -80°С в течение 6 месяцев (рис. 13) и 24 месяцев при -196°С (рис. 14). С 7 суток органотипической консервации была отмечена активная пролиферация клеток размороженных фрагментов лимба с формированием монослоя к 14 суткам.


    Отмечено, что при длительности хранения более 6 месяцев при -80°С восстановления клеточной пролиферации не происходило, что, по-видимому, связано с полным разрушением клеточной массы в лимбальных фрагментах (рис. 15).


    Таким образом, было установлено, что разработанная технология криогенной консервации аллогенных фрагментов лимба с использованием сред содержащих 10% ДМСО и 30% фетальной сыворотки при t -80°С не более 6 месяцев и -196°С в течение 2-х лет и более позволяет сохранить пролиферативную активность и ультраструктуру лимбальных образцов. Это явилось основанием для создания криобанка фрагментов лимба на базе Глазного тканевого банка Головной клиники.


Страница источника: 76

XVII Всероссийская школа офтальмологаXVII Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018 ХVI Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица II. Топография роговицы. Аберрации глаза 2018 Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица II. Топография роговицы. Аберрации глаза 2018 Научн...

 ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества

Сателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Росс...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Эндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференцияЭндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенациональн...

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Рейтинг@Mail.ru