Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

1.6.Клеточная терапия как альтернатива фармакологической иммуносупрессии


1----------

    В 2003 г Национальный институт здоровья и иммунной толерантности США одобрил программу по разработке и внедрению в клиническую практику методов, способствующих формированию иммунной толерантности в организме реципиента для отказа от длительного применения медикаментозной иммуносупрессии в посттрансплантационном периоде и существенного полонгирования сроков адекватного функционирования трансплантата. Большие надежды на выработку иммунной толерантности стали связывать с применением клеточных технологий [193].

    Было установлено, что аутологичные и аллогенные культивированные прогениторные клетки костного мозга (ККМ), независимо от патогенеза заболевания, обеспечивают восстановительную регенерацию поврежденных органов и тканей, а также способствуют нормализации их функции, степень выраженности которой имеет обратную зависимость от исходно предсуществующей тяжести деструктивных процессов [32, 10, 44, 105]. Установлено, что под влиянием стволовых/прогениторных ККМ, как гемопоэтической, так и стромальной фракции (мультипотентные мезенхимные стромальные клетки), при моделировании различных патологических состояний наступают не только местные однотипные регуляторные изменения (ингибирование необратимого апоптоза, улучшение микроциркуляции и восстановление цитокинового баланса), но и системные, которые касаются, прежде всего, нормализации измененной структуры центральных органов иммуногенеза [6, 3, 39]. Восстановление структуры тимуса и селезенки под влиянием ККМ сопровождается перепрограммированием функции этих органов, что проявляется пролонгированной коррекцией цитокинового дисбаланса в организме – снижением уровня провоспалительных и повышением противовоспалительных цитокинов [4].

    Клетки со свойствами мультипотентных мезенхимных стромальных клеток (ММСК) были выделены их многих тканей и детально исследованы с точки зрения молекулярно-генетических характеристик, особенностей роста в культуре и потенций к дифференцировке. Несмотря на большой интерес к ММСК, общепринятых методов их выделения из тканей не существует. Поэтому для облегчения сравнения данных, полученных разными исследователями, Комитет по мезенхимным и тканевым стволовым клеткам Международного общества клеточной терапии в 2006 г предложил набор минимальных критериев для отнесения клеток к ММСК [89]:

    1) адгезивность к пластику при культивировании в стандартных условиях;

    2) экспрессия специфических поверхностных антигенов;

    3) способность дифференцироваться in vitro в остеобласты, адипоциты и хондробласты.

    Отбор клеток по их адгезивности к пластику является обязательной стадией подавляющего большинства применяемых в настоящее время протоколов выделения и культивирования ММСК.

    Анализ поверхностного фенотипа (как правило, с использованием метода проточной цитофлуориметрии) в последнее время широко используется для идентификации и выделения различных клеточных популяций. Этот метод основан на выявлении экспрессии специфических мембранных молекул с помощью антител, меченных флюоресцентным красителем. Согласно критериям Международного общества клеточной терапии, на поверхности ММСК человека должны одновременно присутствовать следующие три антигена:

    1) CD73 – экто-5'- нуклеотидаза, исходно выявлена как антиген, распознаваемый моноклональными антителами SH3 и SH4;

    2) CD90 (другое название – Thy-1) – член суперсемейства иммуноглобулинов;

    3) CD105 (известный также как антиген SH2 или эндоглин) – рецептор трансформирующего фактора роста-β (TGFβ).

    Однако ни одна из этих молекул не является строго специфичной для ММСК, поэтому необходимо исключить наличие примеси кроветворных клеток, которые тоже могут нести на своей поверхности эти маркеры. Для этого необходимо убедиться в отсутствии следующих маркеров, свойственных кроветворным клеткам: CD45, CD34, CD11b, CD19, HLA-DR.

    При культивировании в стандартной среде, не содержащей индукторов дифференцировки, ММСК формируют слой адгезивных клеток с морфологией фибробластов. При низкой плотности посева они образуют колонии, при более высокой – монослой, в котором отдельные клоны неразличимы. Пролиферация ММСК in vitro возможна лишь при условии присутствия в среде определенных стимулирующих молекул – факторов роста. В стандартных методиках культивирования источником этих веществ служит фетальная бычья (телячья) сыворотка, добавляемая, как правило, в количестве 10-15% от общего объема среды.

    Популяция ММСК в культуре отличается высокой степенью морфологической гетерогенности. Она содержит, по крайней мере, три морфологических типа клеток – узкие вытянутые клетки веретеновидной формы; крупные широкие сильно распластанные клетки; округлые клетки небольшого размера с высоким ядерно-плазматическим отношением. По наблюдениям ряда исследователей, подобные различия в морфологии отражают неодинаковую степень зрелости клеток: крупные и широкие клетки являются более зрелыми и, видимо, вступившими на путь дифференцировки (коммитированными), тогда как округлые и веретеновидные представляют собой наиболее молодые и потентные предшественники [35, 78, 61, 177].

    Доказано, что ММСК обладают иммуномодуляторными свойствами, способными к ограничению аллогенных реакций. Человеческие ММСК экспрессируют HLA-молекулы класса I в низких уровнях и не экспрессируют ни антигены HLA класса II, ни CD80, CD86 и CD40L ко-стимулирующие молекулы [87, 153], являющиеся активаторами эффекторного иммунного ответа при трансплантации донорских органов и тканей [58]. Кроме того, ММСК способны ингибировать алло-стимулированную Т-клеточную пролиферацию и стимулировать размножение CD4+CD25+Foxp3Т-клеток [48, 159, 50]. Эти свойства, как сообщали, были обусловлены секрецией растворимых медиаторов, таких как простагландин E2, TGFβ-1, IL-10 и HGF [87, 58]. ММСК также ингибируют дифференцирование моноцитов в дендритные клетки [132] и модулируют функции B-клеток [79]. Наконец, было показано, что ММСК подавляют цитотоксичность клеток-киллеров (NK) [206]. Эти свойства ММСК открывают новые перспективы их использования с целью предотвращения реакции отторжения при пересадке аллогенных органов и тканей.

    Основным источником получения ММСК для индукции иммунной толерантности и регенерации при аллогенных трансплантациях органов и тканей, а также при аутоиммунных заболеваниях служит костный мозг или кровь этого же больного. Однако доказано присутствие ММСК-подобных клеток в других органах и тканях [45] и в лимбе [91, 173, 147, 150], которые также обладают свойствами индукции регенераторных и пролиферативных процессов.


Страница источника: 28

 ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества

Сателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Росс...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Эндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференцияЭндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенациональн...

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Рейтинг@Mail.ru