Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Применение новой культуральной среды в культивировании лимбального эпителия ex vivo


1Екатеринбургский центр МНТК «Микрохирургия глаза»
2Уральский государственный медицинский университет Минздрава РФ

    Цель. Сравнить влияние культуральных сред DMEM/F12 и EpiCult-C (селективная среда для эпителия протоков молочных желез) на морфологию и фенотип культивированного ex vivo лимбального эпителия.
    Материал и методы. Корнеолимбальные кольца, взятые от 5 трупных доноров, культивировали в стандартных условиях суспензионным методом на деэпителизированной амниотической мембране с добавлением двух различных культуральных сред — DMEM/F12 +10%FBS + инсулин + трансферрин + EGF (культура I) и EpiCult-C (культура II) в течение 21 суток с air-lifting на последней неделе. Морфологию полученных культур исследовали при помощи стандартного гистологического окрашивания гематоксилин-эозином фиксированных срезов. На 14 сутки проводили фазово-контрастную микроскопию и фотографировали полученные культуры. Для оценки фенотипа проводили ИГХ-исследование, используя маркеры СК и пролиферативной активности — p63 и ki67 соответственно. В качестве контрольной группы были взяты 4 трупные роговицы (2 донора). Индекс пролиферации оценивали как процент ki67 позитивных клеток среди всех подсчитанных клеток.
    Результаты. Фазово-контрастная микроскопия показала, что размеры базальных клеток эпителия в культуре II статистически значимо меньше, чем в культуре I: средний размер 11,7 мкм (7,2-37,7 мкм) и 20,4 мкм (11,0-60,0 мкм) соответственно, p=0,024. Соответствующие значения для поверхностных клеток в культурах I и II статистически не отличались: средний размер 45,1 мкм (23,8-73,0 мкм) и 70,5 мкм (45,8-76,4 мкм) соответственно, p=0,09. Культивированный эпителий на обеих средах формировал от 3 до 6 клеточных слоев. Кубические базальные клетки и ядерно-цитоплазматическое соотношение 1:1 в культуре I морфологически больше соответствовало контрольным образцам трупных роговиц, в то время как в культуре I базальные клетки часто имели уплощенную форму, эллиптиформные ядра и ядерно-цитоплазматическое соотношение 1:2-1:3. Иммуногистохимическое исследование не выявило статистически значимой разницы в количестве p63-позитивных клеток в культурах I и II: средние значения 2,75% (1,95-3,1%) и 3,5% (2,95%-4,0%) соответственно, p=0,47. Индекс пролиферации в обеих группах также статистически значимо не отличался: в культуре I — 13,0% (9,0-17,0%) и в культуре II — 15,8% (6,0-36,0%), p=0,367.
    Выводы. Полученные данные демонстрируют, что обе культуральные среды — DMEM/F12 и EpiCult-C — сравнимы по влиянию на стволовой фенотип и пролиферативную активность клеток лимбального эпителия ex vivo. Более того, эпителий, культивированный на среде EpiCult-C, имеет лучшие морфологические характеристики и может быть применен для лечения тяжелой лимбально-клеточной недостаточности.


Страница источника: 87

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru