Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Методика локального субретинального введения мезенхимальных стволовых клеток, меченных магнитными частицами


1МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава РФ
2Калужский филиал «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава РФ
3Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифософского

Актуальность. До настоящего времени стволовые клетки в офтальмологии применялись в экспериментах для восстановления повреждений роговицы, сетчатки и зрительного нерва.

Было исследовано влияние стволовых клеток на функциональное состояние и степень выраженности дегенеративных изменений в сетчатке у крыс линии Campbell, на проявление каинатной оптиконейропатии, при лечении частичной атрофии зрительного нерва. Все авторы описывают сложность визуализации клеток в экспериментах in vivo после трансплантации, а также кратковременность эффекта, связанную с затруднением фиксации клеток в месте введения, их миграцией в другие отделы глаза.

Для решения вопроса фиксации стволовых клеток в определенном месте по данным литературы предложено множество методов их локального введения, в максимальном приближении к месту повреждения: внутривенное, субконъюнктивальное, субтеноновое, парабульбарное, интравитреальное, супрахориоидальное; введение в канал, образованный после радиальной оптической нейротомии; субретинальное. При разнообразии предложенных способов остается нерешенным вопрос фиксации стволовых клеток в месте их введения для оказания положительного эффекта непосредственно в зоне повреждения.

Цель. Разработать и экспериментально обосновать эффективность методики локального субретинального введения стволовых клеток, меченных магнитными частицами.

Материал и методы. Исследование проведено на 6 глазах 3 кроликов породы шиншилла.

Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) выращивали в культуре клеток костного мозга, взятых у GFP-мыши при помощи пункции из подвздошной кости (объем — до 0,1 мл). Выращивание культуры производили в специальном боксе для клеточных культур. По достижении 80-90% конфлюентности к культуре МСК добавляли суспензию магнитных частиц (d=2,8 мкм). Магнитные частицы предварительно обрабатывали поверхностно-активными веществами для создания условий проникновения в цитоплазму клетки. Клетки инкубировали с частицами 24 ч в СО2-инкубаторе. После инкубации культуральную среду меняли и клетки 5-кратно отмывали от свободных магнитных частиц раствором Хенкса.

Суспензию, содержащую стволовые клетки, меченные магнитными частицами, вводили субретинально с помощью специального инструмента для микроподачи жидкости и канюли 41G. Экстрасклерально помещали полимерный эластичный магнитный имплант, который располагали в области субретинального введения суспензии клеток. Контроль за правильностью расположения магнитного импланта осуществлялся при помощи диафаноскопии.

На 1, 3, 7 сутки производили: офтальмоскопию с фоторегистрацией, стандартное офтальмологическое обследование для животных с применением методов флюоресцентной диагностики, электрофизиологические методы исследования (ЭФИ, ЭРГ), оптическую когерентную томографию, морфологическое исследование.

Результаты. На всех 6 глазах 3 экспериментальных животных была достигнута устойчивая фиксация клеточного материала в месте их локального введения, подтвержденная методами оптической когерентной томографии и морфологических исследований.

Выводы. Разработанная методика и устройства для контролируемого локального субретинального введения МСК позволяют осуществлять фиксацию клеточного материала в месте их локального введения и прогнозировать их движения. Использование данной методики введения МСК может послужить основой для изучения механизмов воздействия стволовых клеток в месте повреждения и разработки перспективных стратегий в офтальмологии, открыть новые возможности в качестве средств нейропротекции или альтернативных терапевтических приемов при лечении различной патологии.


Страница источника: 180

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru