Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст
УДК:617.735:616.322-002.2

Экспериментальная модель хронического тонзиллита: особенности микроциркуляции заднего сегмента глаза и ультраструктурные изменения сетчатки


1Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова Министерства здравоохранения Российской Федерации
2Морозовская детская городская клиническая больница Департамента здравоохранения г. Москвы
4Центр охраны зрения «Доктор Оптикус»

В 2012 году научный мир отметил 191-летие со дня рождения Германа фон Гельмгольца, величайшего ученого XIX века. Пожалуй, именно с его объяснения в 1851 году оптических принципов получения зрачкового рефлекса и введения в практику метода офтальмоскопии начинается современная офтальмология. Дальнейшее же развитие офтальмологии, отделившейся от общей хирургии и выделившейся в самостоятельную специальность, стало выдающимся примером научного сотрудничества и обмена информацией с терапевтами, неврологами, эндокринологами и другими специалистами.

Согласно современным представлениям глаз вовлекается в патологический процесс при подавляющем большинстве общих соматических, инфекционных, опухолевых, нейроэндокринных, наследственных и др. заболеваний [2, 8]. Это объясняется несколькими причинами. Во-первых, существует синхронность эмбриогенеза тканей глаза и ряда других органов. Во-вторых, имеется анатомическая близость околоносовых пазух и зубов. В-третьих, морфологической основой ряда наследственных заболеваний органа зрения и различных структур организма является поражение соединительной ткани. В-четвертых, глаз, как забарьерный орган, является мишенью системного иммуновоспалительного патологического процесса. В-пятых, генерализация инфекционного процесса из различных структур организма может приводить в том числе и к поражению органа зрения по механизму системной воспалительной реакции. В-шестых, наследственные болезни обмена веществ являются основой ряда наследственных заболеваний органа зрения [3].

Важную роль в развитии сочетанных соматических заболеваний играет соединительная ткань [4]. Многие элементы соединительной ткани участвуют в иммунных процессах из-за наличия в ней макрофагов, тучных клеток, лимфоцитов и плазмоцитов, лейкоцитов, моноцитов, которые задействованы в процессе иммунной защиты организма, осуществляют фагоцитоз, секретируют монокины, лизоцим, интерферон, интерлейкины, ряд факторов системы комплемента и др. Естественно, патология соединительной ткани вызывает и дисфункцию иммуннокомпетентных клеток [4, 7].

Собственные клинические исследования показывают, что у детей школьного возраста с клиническими проявлениями вторичного иммунодефицита сопутствующая патология наблюдается в 64,2% случаев, а в ее структуре на первых местах стоят заболевания лимфоглоточного кольца и заболевания глаз [6].

Рассмотренные обстоятельства требуют дальнейшего изучения проблемы связи органа зрения с патологией лимфоглоточного кольца, прежде всего в эксперименте, путем моделирования [9].



Цель

Изучение особенностей микроциркуляции заднего сегмента глаза и оценка ультраструктурных изменений сетчатки в условиях экспериментального хронического тонзиллита.



Материал и методы

Экспериментальные исследования проводились на базе вивария Научно-исследовательского института фундаментальных и прикладных биомедицинских исследований на 20 молодых кроликах-самцах породы «шиншилла» с исходной массой тела 2,0-2,5 кг. Исследования проведены в соответствии с основными положениями международной резолюции ARVO (Ассоциации по офтальмологии и исследованию зрения).

В качестве экспериментального вторичного иммунодефицитного состояния использовали модель хронического тонзиллита [1]. Экспериментальная модель создана на 15 кроликах-самцах породы «шиншилла», 5 кроликов составили контрольную группу.

Способ моделирования хронического тонзиллита заключался в следующем. Кроликам породы «шиншилла» после тиопенталового наркоза и последующей фиксации животных, с использованием роторасширяющего инструмента в параминдаликовую клетчатку и в область верхнего полюса небных миндалин инъекционно туберкулиновым шприцем вводили Staphilococcus aureus в дозе 3 млн. микробных тел.

Клиническую оценку состояния глаз кроликов проводили через месяц после начала эксперимента с помощью офтальмоскопии и оптической когерентной томографии на сканере «Stratus ОСТ-3000» («Carl Zeis», США) по протоколу «Линейный». Оценивалась архитектоника слоев сетчатки, толщина слоя нервных волокон, пигментного эпителия и хориоидеи.

Оценка состояния микроциркуляции заднего сегмента глаза кроликов проводилась при помощи контактной лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) на анализаторе ЛАКК-02 (НПП «ЛАЗМА», НПО «Биофизика», Москва) с использованием гелий-неонового датчика длиной волны 0,63 мкм [5]. При записи допплерограммы с заднего сегмента глаза датчик устанавливался на глазное яблоко в 5-6 мм от лимба при максимальном открытии глазной щели.

Оценивали показатель микроциркуляции или перфузии крови (ПМ), а также изучали амплитудно-частотные характеристики микроциркуляции. Количественно оценивались амплитуды: эндотелиальной активности (Аэ), обусловленной функционированием эндотелия (выбросом вазодилататора NO); нейрогенной активности (Ан), отражающей нейрогенную регуляцию прекапиллярных микрососудов (артериол); миогенной активности (Ам), отражающей активность гладкомышечных клеток стенки прекапиллярных сфинктеров; дыхательных колебаний (Ад), характеризующих венулярный отток по венулам; кардиоритма в диапазоне 50-180 колебаний/мин (Ас), характеризующего величину притока артериальной крови по артериолам. Рассчитывались также нейрогенный (НТ) и миогенный тонусы (МТ).

Микрогемодинамику у животных с моделированным хроническим тонзиллитом изучали под общей анестезией. Применяли двухкомпонентный наркоз: для премедикации вводили внутримышечно 2% раствор ксилозина гидрохлорида (рометар). Через 10-15 минут внутривенно в краевую вену уха вводили золетил-50 в дозе 6,6 мг/кг массы тела. Замеры проводились в течение 5 мин.

Фоторегистрация глазного дна осуществлялась на ретинальную камеру.

Морфологические исследования небных миндалин проведены через месяц после начала моделирования. Животных выводили из опыта путем введения воздуха в ушную вену, после чего осуществляли препарирование небных миндалин кроликов.

Кусочки ткани небных миндалин фиксировали в 2,5% растворе глутаральдегида на 0,2 М какодилатном буфере, промывали в дистиллированной воде, обезвоживали в растворах ацетона восходящей концентрации и высушивали методом перехода через критическую точку. Полутонкие срезы, полученные на полосковом микротоме Richert толщиной 6-7 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином по общепринятой методике. Гистологические препараты исследовали на световом микроскопе «Фотомикроскоп 3» («Opton», Германия). Фоторегистрацию осуществляли на цифровую камеру в комплекте аппаратно-программного комплекса автоматической морфоденситометрии «Диаморфобъектив» (компания «ДиаМорф»).

Статистическая обработка данных выполнялась с помощью пакета прикладных программ Statistica 7.0.



Результаты

При офтальмоскопии экспериментальных животных контрольной группы хорошо просматривались как поверхность зрительного нерва, так и волокна медуллярной лучистости вокруг зрительного нерва. Определялась близкая к равномерной пигментация сетчатки (рис. 1).

По данным ОКТ средняя толщина сетчатки ниже зрительного нерва у животных контрольной группы составляла 135,6±5,4 мкм (рис. 2).

У опытной группы животных через месяц от начала проведения эксперимента офтальмоскопически выявлялись очаговая гиперпигментация и очаговая атрофия ПЭС (рис. 3).

Преретинальные слои стекловидного тела у опытной группы животных на оптических томограммах выглядели оптически прозрачными в 100% случаев. Через месяц от начала проведения эксперимента отмечено увеличение толщины сетчатки в среднем до 149,3±6,2 мкм, что несколько превышало показатель контрольной группы животных (рис. 4). В пигментном эпителии сетчатки определялись признаки очаговой гиперплазии. Средняя толщина пигментного эпителия опытной группы животных по сравнению с контролем была увеличена и составляла 45,0±3,0 мкм (р<0,05). Толщина пигментного эпителия сетчатки в контрольной группе животных составляла 33,0±2,0 мкм.

У животных после моделирования хронического тонзиллита определялись дегенеративные изменения в слое нервных волокон сетчатки. Толщина слоя нервных волокон сетчатки у животных опытной группы составляла 64,3±3,5 мкм (р<0,05), что достоверно меньше толщины слоя нервных волокон контрольной группы животных (100,0±5,0 мкм).

У животных опытной группы наблюдалось также уменьшение толщины хориоидеи (в среднем до 64,0±4,0 мкм). В контрольной группе животных толщина хориоидеи составляла 85,0±5,0 мкм. При этом прослеживалась связь снижения толщины хориоидеи с увеличением толщины пигментного эпителия сетчатки.

В результате проведенного исследования выявлены также некоторые особенности в микроциркуляции заднего сегмента глаз животных после моделирования хронического тонзиллита. Так, среднее значение показателя перфузии (М), среднеквадратичного отклонения амплитуды колебания кровотока (?), коэффициента вариации (Kv) в заднем сегменте глаза животных опытной группы статистически значимо меньше аналогичного показателя глаз контрольной группы животных (табл. 1).

Детальный анализ функционирования микроциркуляторного русла, проведенный с помощью амплитудно-частотного анализа колебаний кровотока, показал, что амплитуда миогенных колебаний (Ам) достоверно уменьшилась с 0,61±0,04 пф.ед. до 0,44±0,02 пф.ед. (табл. 2).

Данный факт свидетельствует, по-видимому, о повышении периферического мышечного сопротивления артериол. Сказанное подтверждает изменение амплитуды нейрогенных колебаний (Ан), которая уменьшилась с 0,53±0,05 до 0,37±0,05 пф. ед. (р<0,05). Снижение флаксов нейрогенного диапазона также указывает на увеличение артериолярного тонуса, определяемого нейрогенной активностью.

Амплитуда эндотелиальных колебаний, обусловленная функционированием эндотелия и выбросом им вазодилятатора оксида азота (NO), также уменьшилась с 0,36±0,02 до 0,25±0,04 пф.ед. (р<0,05). Амплитуда дыхательных колебаний достоверно снижена в группе животных с моделированной хронической патологией, что, по-видимому, свидетельствует о повышении микроциркуляторного давления, а достоверное снижение амплитуды кардиоритма указывает на снижение пульсовой волны.

При морфологическом исследовании препаратов небных миндалин контрольной группы кроликов выявлены были незначительные размеры органа с выраженным ветвистым строением крипт (рис. 5). Паренхима миндалин представлена двумя образованиями: лимфатическими узелками и окружающими их скоплениями лимфоцитов. В фолликулярных узелках достаточно четко выявлялся светлый реактивный центр с более крупными и мелкими клетками по периферии, вокруг которого располагались парафолликулярные образования, доля присутствия последних варьировала. В углублениях крипт лимфоидная ткань находилась почти вплотную по отношению к эпителию, но чаще между эпителиальным пластом и лимфоцитами наблюдались различные по степени выраженности поля волокнистой соединительной ткани.

Внутренняя поверхность миндалин, обращенная к зеву, покрыта была многослойным плоским неороговевающим эпителием. Толщина эпителия менялась за счет количества клеточных слоев. В глубине крипт содержалось меньшее количество слоев эпителиального пласта. Наблюдалась единично выраженная лимфо-лейкоцитарная инфильтрация эпителия, с одновременным проявлением десквамации эпителиальных клеток (рис. 6).

Подэпителиальный слой небных миндалин представлен был рыхлой волокнистой тканью с характерными для данного вида ткани структурными компонентами: коллагеновыми волокнами и примерно равным по объему межклеточным веществом, в котором наблюдались клетки фибробластического ряда и макрофаги. Объем соединительной ткани под эпителием незначительный, местами не просматривался. В этом случае парафоликулярные образования вплотную прилегали к эпителиальному пласту. Строма небных миндалин, представленная септотяжами, идущими от капсулы в глубь миндалины, была слабо выражена. Она представляла собой тонкие волокнистые структуры без формирования пучков коллагеновых волокон с немногочисленным клеточным составом.

При исследовании препаратов миндалин опытной группы экспериментальных животных во всех наблюдениях отмечалось истончение многослойного плоского эпителия с явлениями гипер-паракератоза в поверхностных слоях и обусловленная этим процессом десквамация эпителиальных клеток (рис. 7). Выявлена выраженная инфильтрация эпителия не только лимфоцитами, но и полиморфноядерными лейкоцитами. При этом отмечалось формирование в лакунах крипт плотных и/или разреженных пробок, состоящих из инфильтрата (рис. 8).

Следует также отметить, что присутствие папиллярных выростов эпителия лакун, несомненно, способствует задержке лимфоцитов и лейкоцитов и таким образом усугубляет патологический процесс.

Для клеточного состава эпителия характерны дистрофически-деструктивные процессы, что находило свое выражение в вакуолизации базальных клеток, единичном присутствии пикнотически измененных клеток шероховатого слоя и значительно выраженном уменьшении содержания кератогиалиновых гранул и/или их, в основном по периферии, неравномерном распределении в клетках.

Под истонченным эпителием определялся расширенный подэпителиальный слой. Визуально отмечалось значительное увеличение объема соединительной ткани (рис. 9).

Морфологические изменения наблюдались и со стороны сосудов миндалин. Они были расширены, интенсивно сладжированы, в сладже выявлялся лимфо-лейкоцитарный инфильтрат (рис. 10). Отмечались периваскулярные склеротические изменения, что выражалось образованием вокруг мелких и средних сосудов муфтообразных разрастаний соединительной ткани с присутствием в ней клеточных элементов.

Для некоторого количества гемокапилляров и венул были характерны признаки запустевания, при этом ткань вокруг них и участки сосудистых стенок были подвержены гиалинозу.

Изучение паренхимы небных миндалин с помощью светового микроскопа выявило процесс разрастания соединительной ткани, что проявилось образованием выраженных тяжей вокруг фолликул. В соединительнотканных тяжах наблюдались крупные клетки фибробластического ряда, что позволило сделать предположение о возможности замещения паренхимы миндалины соединительной тканью за счет трансформации фибробластов (рис. 11).

Одновременно с разрастанием соединительной ткани наблюдалась выраженная гипертрофия фолликулярных образований на фоне явного визуального увеличения объема парафолликулярных скоплений лимфоцитов. При этом наряду с гипертрофическими изменениями лимфоидной ткани выявлялись некротические очаги измененной паренхимы небных миндалин не инкапсулированной формы (рис. 12).



Заключение

Таким образом, в условиях моделирования хронического тонзиллита с помощью оптической когерентной томографии выявлены изменения в слоях сетчатки в виде утолщения слоя ПЭС, уменьшения слоя нервных волокон, а также уменьшения толщины хориокапиллярного слоя.

Прижизненными неинвазивными исследованиями состояния микроциркуляторного русла заднего сегмента глаза отмечено повышение периферического мышечного сопротивления артериол, и, следовательно, наблюдается картина сосудистого спазма с затруднением кровотока в нутритивное русло.

Результаты морфологического исследования небных миндалин опытной группы кроликов отчетливо продемонстрировали изменения как эпителиального слоя, так и элементов соединительной ткани органа, что, в свою очередь, выражалось в разрастании соединительной ткани в подэпителиальном слое, ослаблении мышечного тонуса сосудов с одновременным изменением проницаемости сосудистой стенки и развивающимся гиалинозом. Все указанные выше изменения расценены как проявления хронического тонзиллита.

Полагаем, что хронический тонзиллит в эксперименте приводит к развитию недостаточности хориоидального кровообращения, вызывающей ишемию сетчатки. В последующем развиваются дистрофические изменения в слое нервных волокон и изменения клеток ПЭС. Изменения в клетках ПЭС в виде гиперплазии, по-видимому, представляют компенсаторно-приспособительную реакцию.


Страница источника: 37

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Восток – Запад 2017 Международная научно-практическая конференция по офтальмологииВосток – Запад 2017 Международная научно-практическая конфер...

Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru