Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Исследование репаративного действия нового биорегулятора, выделенного из сыворотки крови быка


1Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова Российской академии наук
2Институт элементоорганических соединений им. А. Н. Несмеянова Российской академии наук
3Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца Росмедтехнологий

    Разработка новых препаратов для лечения патологий роговицы является актуальной задачей современной биологии и офтальмологии. В этом аспекте следует отметить неослабевающих интерес исследователей к поиску и изучению различных эндогенных биорегуляторов. Одними из таковых являются биорегуляторы сложного строения, обнаруженные нами в межклеточном пространстве различных тканей позвоночных животных [1]. Биорегуляторы данной группы проявляют способность в низких дозах влиять на ход и направленность таких основных процессов как адгезия, миграция клеток, клеточную дифференцировку и пролиферацию [2]. Показано, что данные биорегуляторы стимулируют восстановительные и репаративные процессы в патологически измененных тканях [2-5].

    Цель — изучение ранозаживляющего свойства очищенной фракции биорегулятора, выделенного из сыворотки крови крупного рогатого скота in vivo, а также ее протекторное действие на состояние отдельных структур роговицы глаза позвоночных животных in vitro.

    Материал и методы. Биорегулятор выделяли из сыворотки крови крупного рогатого скота (стерильный, инактивированный коммерческий препарат, используемый в качестве добавки в ростовую среду клеточных культур, производства Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М. П. Чумакова РАМН) по ранее разработанной методике [3, 4]. Исследование проводили, соответственно, на взрослых половозрелых тритонах Pleurodeles waltl, и крысах линии Wistar обоего пола, взятых из аквариального комплекса и вивария Института биологии развития им. Н. К. Кольцова РАН.

    Исследование протекторного действия сывороточного биорегулятора на роговицу глаза крысы в условиях in vitro После декапитации у крыс из глаз микрохирургически выделяли роговицы без области лимба, которые далее культивировали в следующих условиях:

    1 - контрольная серия — среда 199, содержащая 10 % эмбриональной телячьей сыворотки (Sigma);

    2 - опытная серия — среда 199, содержащая 10 % эмбриональной телячьей сыворотки и биорегулятор сыворотки крови в концентрации 10-12 мг белка/мл; культивирование роговиц крыс проводили при 37 оС в течение 7 суток.

    Экспериментальная травма роговицы тритона in vivo

    Микрохирургически в области зрачкового отверстия делали разрез поперек роговицы глаза тритонов, наркотизированных MS222. После операции, начиная с 1-го дня и на протяжении 28 дней ежедневно, тритонов опытной группы головой погружали на 10 минут в раствор сывороточного биорегулятора в концентрации 10-12 мг/мл; животных контрольной группы содержали только в отстоянной водопроводной воде.

    Для исследования методом радиоавтографии пролиферации клеток эпителия роговицы на сроках 7, 14 и 28 суток после операции из каждой группы забирали по 2 тритона (4 глаза) и подсчитывали меченые [3 Н]-Тdr ядра (ИМЯ — индекс меченых ядер, равный отношению количества меченых ядер к общему количеству ядер в поле зрения). Всего подсчитали значения ИМЯ в секторах более чем на 400 срезах. Все полученные данные обрабатывали статистически, используя критерий Стьюдента.

    Результаты и обсуждение. Специфическую активность биорегулятора изучали на экспериментальной модели органотипического культивирования ткани роговицы крысы in vitro. Было показано, что в контрольной серии в роговицах развивались деструктивные процессы: отслоение и деградация эпителиального слоя, нарушение ориентации волокон в строме, деградация клеток эндотелия. При добавлении сывороточного биорегулятора наблюдали сохранение межклеточных адгезионных взаимодействий между эпителием и стромой, эндотелиальные клетки сохранялись, строма имела более упорядоченную структуру, чем в контроле. Таким образом, полученные результаты демонстрируют протекторное действие биорегулятора сыворотки крови на все структуры роговицы крысы.

    Во втором эксперименте изучали репаративное действие биорегулятора, выделенного из сыворотки крови, на роговице тритона in vivo. Клетки эпителия роговицы хвостатых амфибий сохраняют способность к пролиферации в большей мере, чем таковые клетки млекопитающих, в частности, крысы. Поэтому исследование влияния биорегулятора на клеточную пролиферацию в роговице было проведено на глазах тритона с помощью метода авторадиографии в условиях in vivo.

    Было показано, что биорегулятор, выделенный из сыворотки крови, стимулировал пролиферацию эпителиальных клеток роговицы тритона in vivo. Наибольшие различия в величине ИМЯ между группой животных, глаза которых обрабатывали сывороточным биорегулятором, и контрольной группой, наблюдали на сроке 7 дней после произведения разреза роговицы (p < 0,05). На 14-й день после операции эти различия уменьшались, но продолжали оставаться достоверными (p < 0,05). На 28-й день после проведения операции различий между контрольной и опытными группами выявлено не было (p > 0,05). Следует отметить, что на 7-е и 14-е сутки после операции, величины ИМЯ, как в экспериментальных так в и контрольной группах, достоверно превышали значение ИМЯ, определенное для интактных неопрерированных роговиц тритонов, не подвергавшихся операции (в данной группе ИМЯ составил 2,37 ± 1,12 %).

    Наблюдаемое за время проведения опыта постепенное уменьшение значений ИМЯ во всех экспериментальных группах животных, в том числе и контрольной, очевидно, свидетельствует об уменьшении пула пролиферирующих клеток в ткани роговицы в связи с завершением ее регенерации.

    Выводы. На модели экспериментальной раны in vivo и при культивировании целой роговицы глаза позвоночных животных in vitro продемонстрировано ранозаживляющее и протекторное действие биорегулятора, выделенного из сыворотки крови млекопитающих.


Страница источника: 481
Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

«Живая» хирургия в рамках XVI Всероссийской конференции с международным участием «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии»«Живая» хирургия в рамках XVI Всероссийской конференции с ме...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Секундо В. Трансплантация рефрактивной лентикулы  используя VisuMax как способ лечения осложнений операции Lasik. ВидеопрезентацияСекундо В. Трансплантация рефрактивной лентикулы  используя ...

Симпозиум компании «Алкон» с демонстрацией показательных операцийСимпозиум компании «Алкон» с демонстрацией показательных операций

Осложненная катаракта: особенности хирургии и фармакотерапииОсложненная катаракта: особенности хирургии и фармакотерапии

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии XVI Всероссийская конференция с  международным участием Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Бактериальные инфекции глаза: взгляд офтальмолога и офтальмохирургаБактериальные инфекции глаза: взгляд офтальмолога и офтальмо...

Офтальмология: диагностика проблем, пути решенияОфтальмология: диагностика проблем, пути решения

Глаукома:теория и практика. Новый взглядГлаукома:теория и практика. Новый взгляд

Актуальные вопросы в лечении и профилактике ВМДАктуальные вопросы в лечении и профилактике ВМД

Современные аспекты и новые возможности ОКТСовременные аспекты и новые возможности ОКТ

Патология глазной поверхности и глаукома. Новые возможности и новые перспективы в решении «старых» проблемПатология глазной поверхности и глаукома. Новые возможности ...

Новейшие достижения в офтальмологииНовейшие достижения в офтальмологии

X Съезд офтальмологов России X Съезд офтальмологов России

Иммуномодулирующая и противовирусная терапия при лечении воспалительных заболеваний глаз различной этиологииИммуномодулирующая и противовирусная терапия при лечении вос...

«Нова Медика»: новые горизонты офтальмологии«Нова Медика»: новые горизонты офтальмологии

Рейтинг@Mail.ru