Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Диагностика первичной открытоугольной глаукомы методом молекулярно-генетического анализа


1Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней Академии наук Республики Башкортостан

    Первичная открытоугольная глаукома (ПОУГ) относится к группе заболеваний с наследственной предрасположенностью, развитие которых определяется взаимодействием определенных наследственных и средовых факторов, а доля генетически обусловленных случаев составляет по данным различных авторов от 21 до 50 % [1]. В настоящее время диагностика глаукомы основывается на оценке совокупности симптомов, так как ни один из них не является специфичным, а существующие диагностические тесты — достаточно чувствительными [2]. Поэтому развитие методов ранней диагностики ПОУГ на доклинической стадии представляет актуальную задачу.

    По литературным данным, около 10 % случаев глаукомы взрослых обусловлено наследуемыми мутациями в генах миоцилина и гена цитохрома P450 [9]. Кодируемые этими локусами белки миоцилин и одна из белковых фракций цитохрома Р450 важны для нормального функционирования обменных процессов переднего отдела глаза. Идентификация мутаций в этих генах позволяет выявлять лица с высоким риском развития глаукомы и своевременно начинать лечение. Спектр описанных мутаций является специфичным для отдельных популяций и этнических групп [5], что делает невозможным в целях диагностики опираться на данные, полученные в других регионах. В Республике Башкортостан (РБ), характеризующейся полиэтническим составом населения и своеобразием генофонда отдельных этнических групп, подобных исследований ранее не проводилось.

    Цель — изучение спектра и частоты изменений нуклеотидной последовательности генов миоцилина и цитохрома Р450 у больных ПОУГ из Республики Башкортостан и определение диагностического значения выявленных изменений.

    Материал и методы. Всего было обследовано 257 человек. Из них 138 пациентов с ПОУГ, 39 членов их семей и 80 человек группы контроля.

    Все пациенты были разделены на 2 группы. Первую группу составили 37 пациентов с ПОУГ с отягощенной наследственностью. В эту группу включали больных, если в родословной имелось хотя бы два случая ПОУГ при степени родства не менее 50 %. Вторую группу (101 больной), составили пациенты с ПОУГ без отягощенного семейного анамнеза. Контрольную группу составили 80 человек в возрасте 70-80 лет с неосложненной возрастной катарактой без признаков глаукомы. Среди пациентов с ПОУГ мужчин — 85 (61,6 %), женщин — 53 (38,4 %) в возрасте от 31 до 82 лет. Офтальмологическое обследование проводилось при помощи общепринятых методов. Молекулярно-генетические исследование проводилось совместно с сотрудниками лаборатории молекулярной генетики человека Института биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН.

    Был проведен анализ конформационного полиморфизма однонитевых фрагментов ДНК 1, 2, 3 экзонов гена миоцилина, скрининг мутации Q368X в гене миоцилина и мутации R368H в гене цитохрома Р450 в 257 образцах ДНК.

    Были проанализированы те участки генов, где по литературным данным было выявлено наибольшее количество мутаций и которые были ассоциированы с клинической формой первичной открытоугольной глаукомы [8].

    Результаты и обсуждение. SSCP-анализ 1 и 2 экзонов гена миоцилина не выявил изменений подвижности одноцепочечной ДНК в нашей выборке. В экзоне 3 гена миоцилина наблюдались два изменения подвижности одноцепочечной ДНК у двух пациентов с семейным анамнезом ПОУГ. Однако последующий секвенционный анализ не выявил каких-либо изменений в нуклеотидной последовательности ни в самом экзоне, ни в прилегающих к нему интронных областях.

    При молекулярно-генетическом исследовании образцов ДНК больных нашей выборки в третьем экзоне гена миоцилина у одного пациента с ПОУГ обнаружена нонсенс-мутация — Q368X.

    Пациент — 50 лет, башкир по этнической принадлежности, с семейным анамнезом заболевания. Впервые обратился за помощью к офтальмологу по месту жительства в январе 2006 года, после того как ослеп левый глаз. Установлен диагноз: OU — открытоугольная глаукома IV C. Острота зрения OD — p. l.incerta, OS — 0. Постепенное снижение зрения заметил 2 года назад. К офтальмологам не обращался. Брат — 54 года ослеп на оба глаза в возрасте 48 лет вследствие глаукомы.

    На мутацию Q368X приходится 40 % от всех найденных в мире. При мутации Q368X в 1102 положении происходит замена цитозина на тимин и образование стопкодона, результатом которого является синтез укороченного белка. Синтезируемый с мутантной мРНК протеин содержит 367 аминокислотных остатков вместо 504 и белок оказывается лишенным значительной части ольфактомединподобного домена, необходимого для нормального функционирования миоцилина. Мутантный белок становится нерастворимым, накапливается внутри клеток трабекулярной сети, вызывая их дистрофические изменения и последующую гибель посредством апоптоза. Следствием этих процессов является увеличение сопротивления оттоку внутриглазной жидкости и повышение внутриглазного давления [8].

    Таким образом, частота мутации Q368X гена миоцилина в группе с отягощенной наследственностью составляет 1,35 %, что указывает на целесообразность ее тестирования у лиц с семейным анамнезом заболевания.

    Ген цитохрома 450, картированный в 1996 году, кодирует мультифункциональный фермент — цитохром Р450, относящийся к классу монооксигеназ, участвующий в создании новых функциональных групп (—OH, —NH2, —COOH) в сложных органических молекулах многих органов и тканей [7]. Предполагается, что ген цитохрома Р450 может действовать как модификатор гена миоцилина [6].

    В 2002 году была идентифицирована мутация R368H гена цитохрома Р450, которая в гетерозиготном состоянии в сочетании с различными мутациями в гене миоцилина является причиной возникновения ПОУГ, причем манифестация заболевания происходит в конце первой — начале второй декады жизни. ПОУГ, вызванная мутацией R368H, характеризуется более тяжелым течением (ранее начало заболевания, быстрое прогрессирование). Механизм действия данной мутации связан с конформационными изменениями четвертичной структуры молекулы цитохрома Р4501В1, и как следствие, со снижением активности фермента [12]. Был проведен скрининг мутации R368H в 138 образцах ДНК больных ПОУГ, а также их родственников и в 80 образцах ДНК группы контроля.

    Мы не выявили мутацию гена цитохрома Р450 ни у одного из обследованных. По-видимому, причиной развития ПОУГ у больных из Башкортостана могут быть какие-либо другие мутации в гене цитохрома Р 450.

    Выводы. Выявленная частота мутации Q368X гена миоцилина указывает на целесообразность ее тестирования у лиц с семейным анамнезом ПОУГ. Отсутствие выявленной мутации R368H диктует необходимость продолжения поиска мутаций в гене цитохрома Р 450, характерных для населения республики Башкортостан.


Страница источника: 242

Новые технологии в контактной коррекции.  В рамках  Всероссийской научно-практической конференции «Новые технологии в офтальмологии - 2017»Новые технологии в контактной коррекции. В рамках Всеросси...

Новые технологии в офтальмологии -  2017 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии - 2017 Всероссийская научн...

XVI Всероссийская школа офтальмологаXVI Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017 ХV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении...

Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмологов «Невские горизонты - 2016»Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции офтальмо...

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru