Online трансляция


Научно-практическая конференция с международным участием
Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий
Роговица I. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы в лечении кератоэктазий
Москва. Гостиница Holiday Inn Sokolniki
4 февраля 2017 г.



15-я Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием
Современные технологии лечения витреоретинальной патологии
Современные технологии лечения витреоретинальной патологии
Сочи, 16-17 марта 2017
Официальный сайт

Партнеры


Valeant thea
Allergan Фокус
santen tradomed
sentiss



Издания


Российская офтальмология онлайн Российская
Офтальмология Онлайн

№ 22 2016
№ 21 2016
№ 20 2015
№ 19 2015
№ 18 2015
...
Журнал Офтальмохирургия Журнал
Офтальмохирургия

№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
№ 2 2016 г.
№ 1 2016 г.
...
Журнал Новое в офтальмологии Новое в
офтальмологии

№ 4 2016 г.
№ 3 2016 г.
№ 2 2016 г.
№ 1 2016 г.
...
Российская детская офтальмология Российская
детская офтальмология

№ 4 2016
№ 3 2016
№ 2 2016
№ 1 2016
...
Современные технологии в офтальмологии Современные технологии
в офтальмологии

№ 5 2016
№ 4 2016
№ 3 2016
№ 2 2016
...
Восток – Запад Восток - Запад.
Точка зрения

Выпуск 4. 2016
Выпуск 3. 2016
Выпуск 2. 2016
Выпуск 1. 2016
...
Новости глаукомы Новости
глаукомы

№1 (41) 2017
№1 (37) 2016
№1 (33) 2015

....
Мир офтальмологии Мир офтальмологии
№ 6 (32) Декабрь 2016
№ 5 (31) Октябрь 2016
№ 3 (29) Июнь 2016
№ 2 (28) Апрель 2016
№ 1 (27) Март 2016
....


Сборники статей


 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст
УДК:617.7-007.681

Интраоперационная профилактика рубцевания при моделировании непроникающей глубокой склерэктомии в эксперименте in vivo


1Российская академия наук
2МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова Росмедтехнологии» Минздрава РФ

     Прогрессирующие дистрофические процессы склеры при глаукоме способствуют грубому избыточному рубцеванию хирургически сформированных путей оттока и, как следствие, приводят к повышению офтальмотонуса в разные сроки после антиглаукомных операций (АГО) [3]. Декомпенсация внутриглазного давления (ВГД) обусловливает необходимость проведения повторных хирургических вмешательств. Проблема избыточного рубцевания обусловливает необходимость изучения контроля фибропластических процессов в послеоперационной ране. С целью подавления пролиферации фибробластов в клинической практике наиболее часто используются цитостатики (антиметаболит 5-фторурацил и противоопухолевый антибиотик митомицин-С) [2, 10, 14]. Однако эти препараты обладают токсическим действием на все активно пролиферирующие клетки, и именно с этим связаны такие серьезные осложнения, как кератопатия (50-55%), формирование кистозных подушек, несостоятельность швов и формирование наружных фистул (36-38%), геморрагическая цилиохориоидальная отслойка (5-9%) и, как следствие, хроническая гипотония, гипотоническая макулопатия, поздний эндофтальмит из-за длительного заживления послеоперационной раны (1-2%) [11, 12].
    В этой связи актуален поиск естественных регуляторов фибробластического процесса в ране. В последнее время активно развивается направление в изучении и применении цитокинов или антител к ним, а также сульфатированных гликозаминогликанов [1, 8].
    Гликозаминогликаны (ГАГ) являются компонентами клетки, клеточных мембран, экстрацеллюлярного матрикса [5]. Они — естественные компоненты любой ткани и в зависимости от локальной концентрации, качественного состава могут регулировать процессы воспаления и заживления раны, в том числе склеральной.
    Гликозаминогликаны представляют собой неразветвленные полисахаридные цепи, состоящие из повторяющихся дисахаридных единиц, одна из которых является аминосахаром, который в большинстве случаев сульфатирован, другая является уроновой кислотой.
     Сульфатированные гликозаминогликаны (сГАГ) — полианионные соединения, за счет этого они регулируют обменные процессы в брадитрофных тканях, могут менять конформацию различных молекул, тем самым определяя их активность и регулируя продукцию цитокинов, созревание клеток воспалительного ряда. При репаративных процессах сГАГ регулируют агрегацию молекул коллагена, определяют длину, диаметр и ориентацию фибрилл [5, 9, 16].
    В последнее время ведутся исследования по применению гликозаминогликанов в антикоагулянтной терапии, онкологии, неврологии, при лечении остеоартритов, васкулитов, также их активно используют для ранозаживления [13, 15, 17].
    Сульфатированные ГАГ используются в качестве компонентов препаратов с ростподавляющим действием для лечения таких серьезных заболеваний, как опухоли соединительной ткани [18].
    В офтальмологии разработаны препараты на основе хондроитин сульфатов: глазные капли «Баларпан» (ООО «НЭП «Микрохирургия глаза», Россия), стимулирующие регенеративные процессы роговицы; вископротекторы Оквис 0,3%, Оквис 2% (ООО «Дубна-Биофарм», Россия), обладающие противоотечным и противовоспалительным действиями [1]; вископротекторы «Дисковиск», «Вискот» (Алкон, США), защищающие ткани глаза во время операции и ускоряющие процесс заживления.
    Сотрудниками ООО «НЭП «Микрохирургия глаза» была разработана смесь кератан сульфата и хондроитин сульфатов, выделенная по оригинальной технологии из прозрачных роговиц свиней, которые по физиологическим характеристикам близки роговице человека. В эксперименте in vitro на культуре фибробластов были изучены функции различных концентраций данной смеси сГАГ в двух формах — растворе и геле. По результатам эксперимента был выявлен бимодальный эффект смеси сГАГ, при этом высокие ее концентрации обладают антипролиферативными свойствами [6, 7].
    
    Цель
    Экспериментально-морфологическое обоснование антипролиферативного эффекта смеси сульфатированных гликозаминогликанов при ранозаживлении склеры на модели непроникающей глубокой склерэктомии у кроликов.
    
    Материал и методы
    Эксперимент был выполнен на 28 глазах лабораторных животных (14 половозрелых кроликов породы Шиншилла весом 2,5-3,5 кг). Животные были разделены на одну опытную (10 глаз) и две контрольные группы (по 9 глаз в каждой группе).
    Всем животным в условиях операционной под наркозом было произведено иссечение глубоких слоев склеры по типу непроникающей глубокой склерэктомии (НГСЭ), что послужило моделью для фибробластических процессов в склеральной ране. Полноценную операцию НГСЭ с функциональным эффектом провести у кроликов не представляется возможным из-за различий в строении дренажной системы и неполноценного Шлеммова канала (вследствие этого отсутствует биодеградирующее влияние водянистой влаги на сформированную интрасклеральную полость).
    В опытной группе (10 глаз) интраоперационно под поверхностный склеральный лоскут вводилась 1,0%-ная смесь сГАГ на вязком носителе (2% гидроксипропилметилцеллюлозы — 2% ГПМЦ) для обеспечения пролонгированного эффекта [7].
    В первой контрольной группе (9 глаз) не вводились экзогенные вещества.
    Во второй контрольной группе (9 глаз) интраоперационно под поверхностный склеральный лоскут вводилась 2%-ная ГПМЦ без добавления смеси сГАГ.
    Животных выводили из эксперимента путем воздушной эмболии через 1, 3, 6 недель после операции. Глазные яблоки энуклеировали. Затем после фиксации в растворе нейтрального формалина подвергали стандартной обработке с обезвоживанием и обезжириванием в спиртах восходящей концентрации, заключали в парафин и проводили гистологическое исследование. Изготовленные серийные срезы окрашивали гематоксилин-эозином по методике Ван Гизона и изучали под микроскопом Leica DMLB2 при 50-, 100-, 200- и 400-кратных увеличениях с последующим фотографированием. На 1-е, 3-е и 7-е сутки после операции и перед энуклеацией экспериментальным животным проводили биомикроскопию и непрямую офтальмоскопию.
    Результаты исследования in vivo: роговица оставалась прозрачной на протяжении всего исследования, во всех глазах передняя камера была равномерной, средней глубины, водянистая влага — прозрачной, сохранялась живая реакция зрачка на свет, а также обычные цвет и структура радужной оболочки. Хрусталик был прозрачным, рефлекс с глазного дна — розовым. В течение всего периода наблюдения диск зрительного нерва, сосуды сетчатки и хориоидеи были без патологических изменений. В глазах опытной и контрольных групп в первые сутки наблюдали смешенную инъекцию сосудов глазного яблока в месте операционного вмешательства, полностью исчезавшую к 3-му дню.
    При гистологических исследованиях в первой контрольной группе после выполнения модели НГСЭ через одну неделю отмечали разнонаправленные края иссеченных волокон склеры, выступающие в интрасклеральную полость (ИСП). Через три недели было отмечено созревание коллагена, деформация и истончение поверхностного склерального лоскута в области операции; интрасклеральная полость отсутствовала (рис. 1). К 6-й неделе формировался грубый рубец с деформацией поверхностного склерального лоскута (рис. 2а).
    Во второй контрольной группе с интраоперационным введением только вязкого носителя после выполнения модели НГСЭ отмечалось удлинение сроков сохранения ИСП (через три недели — частичное сохранение ИСП), но в итоге к 6-й неделе происходило формирование рубца аналогичного первой контрольной группе (рис. 2б).
    В опытной группе (рис. 3) с интраоперационным введением вязкого носителя, насыщенного 1,0%-ной концентрацией сГАГ, при гистологическом исследовании к концу 1-й недели отмечали, что стенки ИСП без разволокнения, воспалительная реакция — минимальная (отсутствие клеточной инфильтрации стенок ИСП, малое количество фибробластов). В течение трех недель ИСП сохранялась. Отмечено отсутствие зрелого коллагена, наличие только рыхлой волокнистой соединительной ткани. К 6-й неделе зона сформированной ИСП была пористой, пронизана тонкостенными капиллярами, окруженными рыхлой волокнистой соединительной тканью. Наружный склеральный лоскут и прилежащая конъюнктива были разрыхлены.
    
    Обсуждение
    В норме свободные сГАГ практически отсутствуют. Их синтез всегда предшествует синтезу коллагена, образованию рубцовой соединительной ткани и определяет ее тип [5].
    При первичной альтерации в экстрацеллюлярном матриксе появляются поврежденные волокна коллагена, которые являются одними из сильных активаторов медиаторов воспаления, хемоаттрактантами для клеток воспалительного ряда, фибробластов и их пролиферации. В случае введения в зону повреждения экзогенных сГАГ за счет их полианионности происходит взаимодействие их с белковыми компонентами раны. При этом они нейтрализуют антигенное действие белковых фрагментов и дальнейший каскад воспалительной реакции [4]. Это подтверждается гистологически — в проведенной работе в зоне операции при экзогенном добавлении сГАГ отмечается снижение количества лимфоцитов в окружающих тканях и малое количество фибробластов.
    За счет своей полианионности они очень хорошо связывают молекулы и могут менять их конформацию. Таким образом, сГАГ могут снижать биологическую активность различных цитокинов и ферментов, уменьшая вторичную альтерацию тканей (вторичное повреждение ткани вследствие воздействия на нее различных ферментов, усиливающих воспалительную реакцию) [4].
    Это подтверждается в опытной группе, где экзогенные сГАГ в гелевой форме, насыщенной 1,0%-ной концентрацией активного вещества, препятствовали быстрому разрушению коллагенового каркаса, обеспечивая временное формирование матрикса из частично деградированного коллагена, который менее устойчив к биораспаду. Это позволило приостановить образование грубого рубца и обеспечить впоследствии более быстрое его замещение на обычную для данной локализации соединительную ткань.
    Таким образом, сГАГ при введении в рану начинают моментально воздействовать с поврежденными белковыми волокнами, а постепенно высвобождаясь из вязкого носителя, принимают участие в регулировании фибропластических процессов, улучшая репарацию при ранозаживлении и предотвращая грубое рубцевание.
    
    Выводы
    Оригинальные сГАГ, состоящие из кератансульфата и хондроитинсульфатов в концентрации 1,0% на вязком носителе, обладают антипролиферативными свойствами при ранозаживлении склеры на модели НГСЭ у кроликов, не обладают токсическим действием и могут рассматриваться для применения в клинике для сохранения просвета интрасклеральной полости при выполнении антиглаукомных операций у пациентов с глаукомой.


Страница источника: 56
Сателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХIV ежегодного конгресса Рос...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016«Живая» хирургия в рамках конференции Современные технологии...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2016Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках IX Российского общенациональ...

На стыке науки и практикиНа стыке науки и практики

Федоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2016 XIII Всероссийская научно-практиче...

Актуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XI Всероссийская научная к...

Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтальмохирургии с международным участием Восток – Запад 2016 Научно-практическая конференция по офтал...

Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2016 Сателлитные симпозиумы в рамках Международ...

Занимательная аккомодологияЗанимательная аккомодология

Невские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологовНевские горизонты - 2016 Научная конференция офтальмологов

Заболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторонЗаболевания глазной поверхности. Взгляд со всех сторон

Интересное об известномИнтересное об известном

Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-практическая конференция Новые технологии в офтальмологии 2016 Всероссийская научно-п...

Витреоретинальная хирургия. Макулярный разрывВитреоретинальная хирургия. Макулярный разрыв

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2016 ХIV Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта использования новой офтальмологической системы CENTURION®Совет экспертов, посвященный обсуждению первого опыта исполь...

HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незаменимой!HRT/Spectralis* Клуб Россия 2015 – технология, ставшая незам...

Три письма пациента. Доказанная эффективность леченияТри письма пациента. Доказанная эффективность лечения

Синдром «сухого» глаза: новые перспективыСиндром «сухого» глаза: новые перспективы

Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?Многоликий синдром «сухого» глаза: как эффективно им управлять?

Прошлое... Настоящее! Будущее?Прошлое... Настоящее! Будущее?

Проблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиумПроблемные вопросы глаукомы IV Международный симпозиум

Секундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT Lisa Tri ToricСекундо В. Двухлетний личный опыт с линзами AT Lisa Tri и AT...

Инновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной хирургииИнновации компании «Алкон» в катарактальной и рефракционной ...

Применение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических ИОЛ HOYA iSert Toric в рефракционной хирургии катарактыПрименение устройств HOYA iSert Toric. Применение торических...

Рейтинг@Mail.ru